Fysisk-kemiske metoder til lægemiddelanalyse. Undersøgelse af kvaliteten af ​​lægemidler Metoder til analyse af lægemidler ved GF-eksempler

Den udbredte introduktion af principperne for evidensbaseret medicin i klinisk praksis skyldes i høj grad det økonomiske aspekt. Den korrekte fordeling af midler afhænger af, hvor overbevisende de videnskabelige data om den kliniske og omkostningseffektive af metoder til diagnose, behandling og forebyggelse er. I klinisk praksis bør specifikke beslutninger træffes ikke så meget på grundlag af personlig erfaring eller ekspertudtalelse, men på grundlag af strengt dokumenterede videnskabelige data. Opmærksomheden bør ikke kun rettes mod nytteløsheden, men også på manglen på evidensbaseret dokumentation for fordelene ved at bruge forskellige metoder til behandling og forebyggelse. I øjeblikket er denne bestemmelse af særlig relevans, da kliniske forsøg hovedsageligt finansieres af producenter af medicinske varer og tjenesteydelser.

Begrebet "evidensbaseret medicin" eller "evidensbaseret medicin" blev foreslået af canadiske videnskabsmænd fra Mac Master University i Toronto i 1990. Evidensbaseret medicin er ikke en ny videnskab, men snarere en ny tilgang, retning eller teknologi til at indsamle, analysere, opsummere og fortolke videnskabelig information. Behovet for evidensbaseret medicin er primært opstået i forbindelse med stigningen i mængden af ​​videnskabelig information, især inden for klinisk farmakologi. Hvert år introduceres flere og flere nye lægemidler i klinisk praksis. De studeres aktivt i adskillige kliniske undersøgelser, hvis resultater ofte er tvetydige og nogle gange endda direkte modsatte. For at bruge den modtagne information skal den ikke kun analyseres omhyggeligt, men også opsummeres.

For rationel brug af nye lægemidler, opnåelse af deres maksimale terapeutiske effekt og forebyggelse af deres bivirkninger, er det nødvendigt at opnå en omfattende beskrivelse af lægemidlet, data om alle dets terapeutiske og mulige negative egenskaber allerede på teststadiet. En af de vigtigste måder at skaffe nye lægemidler på er screening af biologisk aktive stoffer. Det skal bemærkes, at denne måde at søge efter og skabe nye lægemidler på er meget tidskrævende - i gennemsnit falder et lægemiddel, der er værd at være opmærksom på, på 5-10 tusinde undersøgte forbindelser. Gennem screening og tilfældige observationer blev der fundet værdifulde lægemidler, som kom ind i lægepraksis. Tilfældighed kan dog ikke være hovedprincippet i udvælgelsen af ​​nye lægemidler. Med udviklingen af ​​videnskaben blev det helt indlysende, at skabelsen af ​​lægemidler skulle være baseret på identifikation af biologisk aktive stoffer involveret i vitale processer, studiet af patofysiologiske og patokemiske processer, der ligger til grund for udviklingen af ​​forskellige sygdomme, samt en in- dybdegående undersøgelse af mekanismerne for farmakologisk virkning. Præstationer inden for de biomedicinske videnskaber gør det muligt i stigende grad at udføre rettet syntese af stoffer med forbedrede egenskaber og en vis farmakologisk aktivitet.

Præklinisk undersøgelse af stoffers biologiske aktivitet er normalt opdelt i farmakologisk og toksikologisk. En sådan opdeling er betinget, da disse undersøgelser er indbyrdes afhængige og er baseret på de samme principper. Resultaterne af undersøgelsen af ​​akut toksicitet af medicinske forbindelser giver information til efterfølgende farmakologiske undersøgelser, som igen bestemmer intensiteten og varigheden af ​​undersøgelsen af ​​stoffets kroniske toksicitet.

Formålet med farmakologiske undersøgelser er at bestemme lægemidlets terapeutiske aktivitet såvel som dets virkning på kroppens vigtigste anatomiske og fysiologiske systemer. I processen med at studere et stofs farmakodynamik etableres ikke kun dets specifikke aktivitet, men også mulige bivirkninger forbundet med den farmakologiske virkning. Effekten af ​​et forsøgslægemiddel på syge og raske organismer kan variere, derfor bør farmakologiske tests udføres på modeller af de relevante sygdomme eller patologiske tilstande.

I toksikologiske undersøgelser fastslås arten og sværhedsgraden af ​​lægemidlers mulige skadevirkninger på forsøgsdyr. Der er tre stadier i toksikologiske undersøgelser:

undersøgelse af akut toksicitet af et stof med en enkelt injektion;

bestemmelse af kronisk toksicitet af forbindelsen, som inkluderer gentagen brug af lægemidlet i 1 år, og nogle gange mere;

bestemmelse af lægemidlets specifikke toksicitet - onkogenicitet, mutagenicitet, embryotoksicitet, herunder teratogene virkninger, sensibiliserende egenskaber samt evnen til at forårsage lægemiddelafhængighed.

Undersøgelsen af ​​undersøgelseslægemidlets skadelige virkning på forsøgsdyrs krop giver os mulighed for at bestemme, hvilke organer og væv der er mest følsomme over for dette stof, og hvad der skal lægges særlig vægt på i kliniske forsøg.

Formålet med kliniske forsøg er at evaluere den terapeutiske eller profylaktiske effektivitet og tolerabilitet af et nyt farmakologisk middel, at etablere de mest rationelle doser og regimer til dets anvendelse, samt at sammenligne det med eksisterende lægemidler. Ved evaluering af resultaterne af kliniske forsøg bør følgende karakteristika tages i betragtning: tilstedeværelsen af ​​en kontrolgruppe, klare kriterier for inklusion og udelukkelse af patienter, inklusion af patienter i studier før valg af behandling, tilfældigt (blindt) valg af behandling , en passende metode til randomisering, blind kontrol, blind evaluering af behandlingsresultater, information om komplikationer og bivirkninger, information om patienters livskvalitet, information om antallet af patienter, der droppede ud af undersøgelsen, tilstrækkelig statistisk analyse, der indikerer navne på de anvendte tekster og programmer, statistisk styrke, information om størrelsen af ​​den identificerede effekt.

Kliniske forsøgsprogrammer for forskellige grupper af lægemidler kan variere betydeligt. Nogle væsentlige bestemmelser skal dog altid afspejles. Målene og formålene med testen skal være klart angivet; bestemme kriterierne for udvælgelse af patienter; angive metoden til fordeling af patienter i hoved- og kontrolgrupper og antallet af patienter i hver gruppe; metoden til at etablere effektive doser af lægemidlet, varigheden af ​​undersøgelsen; kontrolmetode (åben, blind, dobbelt osv.), komparatorlægemiddel og placebo, metoder til kvantitativ analyse af virkningen af ​​undersøgelseslægemidler (registreringspligtige indikatorer); metoder til statisk databehandling.

Ved evaluering af publikationer om behandlingsmetoder skal det huskes, at udelukkelseskriterierne for patienter fra undersøgelsen er specificeret ret ofte, og inklusionskriterierne er mindre almindelige. Hvis det ikke er klart, på hvilke patienter lægemidlet blev undersøgt, så er det svært at vurdere informationsindholdet i de indhentede data. Det meste af forskningen udføres på specialiserede universitetshospitaler eller forskningscentre, hvor patienter naturligvis adskiller sig fra patienter på distriktsklinikker. Derfor bliver der efter de indledende test udført mere og mere forskning. Først - multicenter, når på grund af involvering af forskellige hospitaler og de ambulante funktioner i hver af dem udjævnes. Åbn derefter. Med hvert trin øges tilliden til, at forskningsresultaterne kan anvendes på ethvert hospital.

Spørgsmålet om at fastlægge dosis og kur for undersøgelseslægemidlet er meget vigtigt og vanskeligt. Der er kun de mest generelle anbefalinger, primært at starte med en lav dosis, som gradvist øges, indtil den ønskede eller bivirkning opnås. Når der udvikles rationelle doser og regimer for undersøgelseslægemidlet, er det ønskeligt at fastslå bredden af ​​dets terapeutiske virkning, intervallet mellem de mindste og maksimale sikre terapeutiske doser. Varigheden af ​​brugen af ​​undersøgelseslægemidlet bør ikke overstige varigheden af ​​toksikologiske test på dyr.

I processen med kliniske forsøg med nye lægemidler skelnes der mellem 4 indbyrdes forbundne faser (stadier).

Fasen i de første kliniske forsøg kaldes "sighting" eller "klinisk-farmakologisk". Dens formål er at fastslå tolerabiliteten af ​​undersøgelseslægemidlet, og om det har en terapeutisk effekt.

I fase II udføres kliniske forsøg på 100-200 patienter. En nødvendig betingelse er tilstedeværelsen af ​​en kontrolgruppe, der ikke afviger væsentligt i sammensætning og størrelse fra hovedgruppen. Patienter i forsøgsgruppen (hoved) og kontrol bør være ens med hensyn til køn, alder, indledende baggrundsbehandling (det er ønskeligt at stoppe den 2-4 uger før studiets start). Grupperne er tilfældigt dannet ved hjælp af tabeller med tilfældige tal, hvor hvert ciffer eller hver kombination af cifre har en lige stor udvælgelsessandsynlighed. Randomisering, eller tilfældig fordeling, er den vigtigste måde at sikre sammenligneligheden af ​​sammenligningsgrupper.

I kliniske forsøg forsøges nye lægemidler sammenlignet med placebo, hvilket giver dig mulighed for at evaluere den reelle effektivitet af terapi, for eksempel dens effekt på patienters forventede levetid sammenlignet med ingen behandling. Behovet for en dobbeltblind metode afgøres af, at hvis lægerne ved, hvilken behandling patienten får (aktivt stof eller placebo), så kan de ufrivilligt ønsketænkning.

En nødvendig betingelse for at gennemføre tilstrækkelige kliniske forsøg er randomisering. Fra overvejelse er det nødvendigt straks at udelukke artikler om undersøgelser, hvor fordelingen af ​​patienter i sammenligningsgrupper ikke var tilfældig, eller fordelingsmetoden var utilfredsstillende (patienterne blev f.eks. opdelt efter ugedagene for indlæggelse på hospital), eller der er slet ingen information om det. Endnu mindre informative er undersøgelser med historisk kontrol (når tidligere opnåede data eller resultaterne af undersøgelser udført i andre medicinske institutioner bruges til sammenligning). I den internationale litteratur rapporteres randomisering i 9/10 artikler om farmakoterapi, men kun 1/3 af artiklerne angiver randomiseringsmetoden. Hvis kvaliteten af ​​randomiseringen er i tvivl, så er forsøgs- og kontrolgruppen højst sandsynligt ikke sammenlignelige, og andre informationskilder bør søges.

Af stor betydning er den kliniske signifikans og statistiske signifikans af behandlingsresultaterne. Resultaterne af et klinisk forsøg eller en befolkningsundersøgelse præsenteres i form af information om hyppigheden af ​​udfald og den statistiske signifikans af forskelle mellem grupper af patienter. Fremstiller forfatteren statistisk signifikante, men små forskelle som klinisk signifikante? Statistisk signifikant er, hvad der faktisk eksisterer med stor sandsynlighed. Det er klinisk signifikant, at dens størrelse (for eksempel størrelsen af ​​reduktionen i dødeligheden) overbeviser lægen om behovet for at ændre sin praksis til fordel for en ny behandlingsmetode.

Metoder, kriterier for evaluering af lægemidlets effektivitet, tidspunktet for måling af de relevante indikatorer bør aftales inden testens start. Evalueringskriterier er kliniske, laboratoriemæssige, morfologiske og instrumentelle. Ofte bedømmes effektiviteten af ​​et forsøgslægemiddel ved at reducere dosis af andre lægemidler. For hver gruppe lægemidler er der obligatoriske og yderligere (valgfri) kriterier.

Formålet med fase III kliniske forsøg er at indhente yderligere information om effektiviteten og bivirkningerne af et farmakologisk middel, klarlægge egenskaberne af lægemidlets virkning og bestemme relativt sjældne bivirkninger. Lægemidlets funktioner hos patienter med kredsløbsforstyrrelser, nyre- og leverfunktion bliver undersøgt, interaktion med andre lægemidler evalueres. Resultaterne af behandlingen registreres på individuelle registreringskort. I slutningen af ​​undersøgelsen opsummeres resultaterne, bearbejdes statistisk og præsenteres i form af en rapport. Tilsvarende indikatorer opnået for samme tidsrum i hoved- og kontrolgruppen sammenlignes statisk. For hver indikator beregnes den gennemsnitlige forskel for den undersøgte tidsperiode (sammenlignet med baseline før behandling), og pålideligheden af ​​den markante dynamik inden for hver gruppe vurderes. Derefter sammenlignes de gennemsnitlige forskelle i værdierne af specifikke indikatorer for kontrol- og eksperimentelle grupper for at vurdere forskellen i virkningen af ​​undersøgelsesmidlet og placebo- eller komparatorlægemidlet. En rapport om resultaterne af kliniske forsøg med et nyt lægemiddel udarbejdes i overensstemmelse med Farmakologisk Udvalgs krav og forelægges udvalget med konkrete anbefalinger. En anbefaling til klinisk brug anses for berettiget, hvis det nye produkt:

Mere effektiv end kendte lægemidler med lignende virkning;

Det har bedre tolerance end kendte lægemidler (med samme tolerance);

Effektiv i tilfælde, hvor behandling med kendte lægemidler ikke lykkes;

Mere omkostningseffektiv, har en enkel behandlingsmetode eller en mere bekvem doseringsform;

I kombinationsterapi øger det effektiviteten af ​​eksisterende lægemidler uden at øge deres toksicitet.

Efter godkendelsen af ​​brugen af ​​et nyt lægemiddel i dyrlægepraksis og dets introduktion påbegyndes fase IV studier - lægemidlets virkning undersøges i forskellige situationer i praksis.

Metoder til undersøgelse af medicinske stoffer er opdelt i:

1. fysisk,

2. kemisk,

3. fysisk og kemisk,

4. biologisk.

Fysiske analysemetoder involverer studiet af et stofs fysiske egenskaber uden at ty til kemiske reaktioner. Disse omfatter: bestemmelse af opløselighed, gennemsigtighed eller grad af turbiditet, farve; bestemmelse af massefylde (for flydende stoffer), fugtighed, smeltepunkt, størkningspunkt, kogepunkt.

Kemiske forskningsmetoder baseret på kemiske reaktioner. Disse omfatter: bestemmelse af askeindhold, reaktion af miljøet (pH), karakteristiske numeriske indikatorer for olier og fedtstoffer (syretal, jodtal, forsæbningstal osv.). Med henblik på at identificere medicinske stoffer anvendes kun sådanne reaktioner, der er ledsaget af en visuel ydre virkning, for eksempel en ændring i opløsningens farve, udvikling af gasser, udfældning eller opløsning af bundfald osv. Kemiske forskningsmetoder også omfatter vægt- og volumenmetoder til kvantitativ analyse, der er anvendt i analytisk kemi (neutraliseringsmetode, udfældning, redoxmetoder osv.). I de senere år har farmaceutisk analyse inkluderet sådanne kemiske forskningsmetoder som titrering i ikke-vandige medier, kompleksometri. Kvalitativ og kvantitativ analyse af organiske medicinske stoffer udføres som regel af arten af ​​de funktionelle grupper i deres molekyler.

Via fysiske og kemiske metoder studere de fysiske fænomener, der opstår som følge af kemiske reaktioner. For eksempel i den kolorimetriske metode måles farveintensiteten afhængigt af koncentrationen af ​​stoffet, i den konduktometriske analyse, måling af opløsningers elektriske ledningsevne mv.

Fysiske og kemiske metoder omfatter: optiske (refraktometri, polarimetri, emission og fluorescerende analysemetoder, fotometri, herunder fotokolorimetri og spektrofotometri, nefelometri, turbodimetri), elektrokemiske (potentiometriske og polarografiske metoder), kromatografiske metoder.

biologiske dette er et dyrestudie (frøer, duer, katte). Defineret i enheder. Udsat for: MPS indeholdende hjerteglykosider, lægemidler indeholdende hormoner, enzymer, vitaminer, antibiotika.

Registrering af ekstemporane lægemidler, VAZ, VAF udføres i overensstemmelse med ordre fra Sundhedsministeriet i Den Russiske Føderation nr. 376 og retningslinjer for et enkelt design.

Etiketter til design af lægemidler fremstillet individuelt og i rækkefølgen af ​​intra-apotek forberedelse og emballering, afhængigt af metoden til deres anvendelse, er opdelt i:

ü etiketter til lægemidler til internt brug med påskriften "Internt", "Internt til børn";

ü etiketter til lægemidler til ekstern brug med påskriften "Ekstern";

ü etiketter til lægemidler til parenteral administration med påskriften "Til injektion";

ü etiketter til øjenmedicin med påskriften "Øjendråber", "Øjensalve".

På alle etiketter til design af lægemidler, fremstillet individuelt og i rækkefølgen af ​​præparat og pakning på apoteket, skal advarselsetiketter svarende til hver doseringsform være trykt på en typografisk måde:

ü for potions - "opbevar på et køligt og mørkt sted", "ryst før brug";

ü for salver, øjensalver og øjendråber - "opbevar på et køligt og mørkt sted";

ü til dråber af intern brug - "opbevares på et sted beskyttet mod lys";

ü til injektioner - "steril".

Alle etiketter skal indeholde advarslen "Opbevares utilgængeligt for børn".

Doseringsformen er angivet i hånden.

Alle etiketter til design af lægemidler fremstillet i rækkefølgen for indkøb og emballering på apotek skal have følgende betegnelser:

ü emblem (skål med en slange);

ü placering af apoteksinstitutionen (virksomheden);

ü navnet på apoteksinstitutionen (virksomheden);

ü påføringsmetode (intern, ekstern, til injektion) eller doseringsform (salve, øjendråber, næsedråber osv.);

dato for forberedelse...;

ü god til ...;

ü serie...;

ü Opbevares væk fra børn.

Teksten til apoteksetiketter beregnet til design af lægemidler, der er fremstillet individuelt, såvel som påføringsmetoden, skal udskrives på russisk eller det lokale sprog.

Det anbefales, at teksten på apoteksetiketter beregnet til design af lægemidler fremstillet i rækkefølgen af ​​præparat og emballering på apoteket, samt deres navne og nødvendige advarselsetiketter, udskrives på en typografisk måde.

Advarselsetiketter på lægemidler har følgende tekst- og signalfarver:

ü "ryst før brug" - grøn skrifttype på hvid baggrund;

ü "opbevar et sted beskyttet mod lys" - hvid skrifttype på blå baggrund;

ü "opbevar et køligt sted" - hvid skrifttype på blå baggrund;

ü "barnlig" - hvid skrifttype på en grøn baggrund;

ü "til nyfødte" - hvid skrifttype på en grøn baggrund;

ü "håndter med omhu" - rød skrift på hvid baggrund;

ü "hjerte" - hvid skrifttype på orange baggrund;

ü "Hold væk fra ild" - hvid skrift på rød baggrund.

Især giftige stoffer (<...>, cyanid og kviksølvoxycyanid) er udstedt med en sort advarselsetiket med navnet på det giftige stof på russisk (eller lokalt) sprog i hvid skrift med billedet af krydsede knogler og et kranie og inskriptionen "gift" og "håndter med omhu" i henhold til gældende bekendtgørelse.

Registrering af lægemidler tilberedt på apoteker (virksomheder) af forskellige ejerformer, i overensstemmelse med de fremlagte ensartede regler for registrering af lægemidler, bidrager til at forbedre kulturen for lægemiddelforsyning til befolkningen, styrke kontrollen med udløbsdatoerne for tilberedte lægemidler og deres pris og henleder opmærksomheden på dem for at eliminere mulige fejl i deres brug.

Fastsættelse af takster

Betalingen inkluderer:

1. Udgifterne til lægemidler

2. Udgifter til hjælpematerialer

3. Udgifter til opvask

4. Omkostninger

Takster godkendes efter ordre fra apoteket.

De indledende data til bestemmelse af produktionsomkostninger er apotekets regnskabs- og rapporteringsdata for den seneste måned.

Antallet af betingede produktionsenheder afspejler den samlede arbejdsintensitet ved fremstilling af én enhed af et lægemiddel og medicinsk udstyr.

For én produktionsenhed accepteres arbejdet udført inden for 10 minutter betinget.

For én produktionsenhed af sterile og flydende doseringsformer, salver, accepteres et lægemiddel, fuldt forberedt i overensstemmelse med de gældende dokumenter og beregnet til udlevering.

Sterile doseringsformer omfatter injicerbare opløsninger, infusionsopløsninger, oftalmiske skylleopløsninger, neonatale opløsninger og olier.

Til ZhLF omfatter løsninger og dråber til intern brug og ekstern brug, olier, renset vand.

Salver omfatter pastaer, linimenter, flydende plastre, suspensioner, emulsioner.

For én enhed pulvere og stikpiller accepteres en doseringsform med emballage til 10 doser konventionelt.

Lignende information.

Farmaceutisk analyse (FA). Det er grundlaget for farmaceutisk kemi og har sine egne karakteristika, der adskiller det fra andre typer analyser. De ligger i det faktum, at stoffer af forskellig kemisk natur udsættes for analyse: uorganiske, organoelement, radioaktive, organiske forbindelser fra simple alifatiske til komplekse naturlige biologisk aktive stoffer. Intervallet af koncentrationer af analytter er ekstremt bredt. Genstandene for farmaceutisk analyse er ikke kun individuelle medicinske stoffer, men også blandinger, der indeholder et andet antal komponenter.

Den årlige genopfyldning af arsenalet af lægemidler nødvendiggør udvikling af nye metoder til deres analyse. Metoder til farmaceutisk analyse skal forbedres systematisk på grund af den løbende stigning i kravene til både kvaliteten af ​​lægemidler og det kvantitative indhold af biologisk aktive stoffer i dem. Derfor stilles der høje krav til farmaceutiske analyser. Den skal være tilstrækkelig specifik og følsom, nøjagtig i forhold til de regulatoriske krav i statens farmakopé X og XI og anden videnskabelig og teknisk dokumentation (FS, GOST), udført i korte perioder med minimale mængder af testpræparater og reagenser .

Afhængigt af de stillede opgaver omfatter farmaceutisk analyse forskellige former for lægemiddelkvalitetskontrol: farmakopéanalyse; trin-for-trin kontrol af lægemiddelproduktion; analyse af doseringsformer for individuel produktion; hurtig analyse i et apotek og biofarmaceutisk analyse. Dens integrerede del er farmakopéanalyse, som er et sæt metoder til forskning i lægemidler og doseringsformer, der er angivet i statens farmakopé eller anden NTD (FS, FSP, GOST). På baggrund af resultaterne opnået under farmakopéanalysen konkluderes lægemidlets overensstemmelse med kravene i Statens farmakopé eller anden videnskabelig og teknisk dokumentation. I tilfælde af afvigelse fra disse krav er lægemidlet ikke tilladt til brug.

Kemisk analyse af planteråvarer. Ifølge teknikken til udførelse og arten af ​​de opnåede resultater er kemiske reaktioner opdelt i flere grupper: kvalitativ, mikrokemisk og histokemisk, mikrosublimering.

For at fastslå ægtheden af ​​medicinske plantematerialer anvendes de enkleste kvalitative reaktioner og kromatografiske tests for aktive og beslægtede stoffer. Metodikken er beskrevet i den relevante regulatoriske dokumentation for den undersøgte type råvare i afsnittet "Kvalitative reaktioner".

Kvalitative reaktioner udføres på tørre råvarer med følgende typer råmaterialer: egebark, viburnum, havtorn, bergenia jordstængler, elecampane jordstængler og rødder, mælkebøtterødder, skumfidus, ginseng, berberis, lindeblomster, hørfrø, ergotsklerotier (til i alt 12 typer råvarer).

Grundlæggende udføres kvalitative reaktioner med ekstraktion (ekstraktion) fra medicinske plantematerialer.

Baseret på egenskaberne af biologisk aktive stoffer ekstraheres de fra råmaterialer med vand, alkohol i forskellige koncentrationer eller et organisk opløsningsmiddel, sjældnere med tilsætning af alkali eller syre.

Et vandigt ekstrakt fremstilles af råmaterialer indeholdende glycosider, polysaccharider, saponiner, phenolglycosider, antraglycosider og tanniner. Forsuret vand bruges til at udvinde alkaloider i form af salte fra råvarer.

En stor gruppe af biologisk aktive stoffer (hjerteglykosider, coumariner, lignaner, flavonoider) ekstraheres med ethyl- og methylalkohol i forskellige koncentrationer.

Hvis reaktionen er tilstrækkelig specifik og følsom, udføres den med et råekstrakt fra råmaterialet.

Disse reaktioner omfatter:

generelle alkaloid sedimentære reaktioner;

reaktioner med en opløsning af aluminiumchlorid til flavonoider (perikon, højlanderfugl, højlandspeber osv.);

Synodetest for flavonoider i immortelle blomster;

reaktion med en alkaliopløsning til anthracenderivater (havtornbark, rabarberrødder osv.);

reaktion med en opløsning af jern-ammoniumalun til tanniner (egebark, serpentine jordstængler, bergenia, etc.).

Ledsagende stoffer (proteiner, aminer, steroler, klorofyl) forstyrrer ofte reaktionen. I dette tilfælde anvendes et renset ekstrakt (for eksempel fra råmaterialer indeholdende hjerteglykosider, coumariner, alkaloider, phenolglycosider, lignaner).

Rens ekstraktet ved at udfælde de medfølgende stoffer med en opløsning af blyacetat og natriumsulfat eller ved at bruge opløsningsmiddelskifteteknikken eller fordelingskromatografi.

Mikrokemiske reaktioner udføres normalt samtidigt med mikroskopisk analyse, idet resultaterne observeres under et mikroskop:

på æteriske og fede olier med en opløsning af Sudan III;

på lignificerede lignificerede grundstoffer med en opløsning af phloroglucinol og en 25 % opløsning af svovlsyre eller koncentreret saltsyre.

Egebark (pulver) omsættes med jernammoniumalun og reaktionsresultatet studeres i mikroskop.

Histokemiske reaktioner er sådanne reaktioner, ved hjælp af hvilke det er muligt at identificere bestemte forbindelser direkte i de celler eller strukturer, hvor de er lokaliseret.

Ifølge Statens Farmakopé XI udføres histokemiske reaktioner på slim med en slagtekropopløsning i skumfidusrødder og hørfrø.

mikrosublimering- direkte adskillelse fra tørt plantemateriale af stoffer, der let sublimeres ved opvarmning. Det resulterende sublimat undersøges under et mikroskop, derefter udføres en mikrokemisk reaktion med det passende reagens.

Metoder til bestemmelse af ægtheden af ​​medicinske plantematerialer. Råmaterialernes ægthed bestemmes af makroskopiske, mikroskopiske, kemiske og luminescerende analyser.

makroskopisk analyse. For at udføre det skal du kende planternes morfologi. De studerer udseendet af råmaterialer med det blotte øje eller med et forstørrelsesglas, måler partikelstørrelsen med en millimeterlineal. I dagslys bestemmes råvarens farve ud fra overfladen, ved bruddet og i snittet. Lugten etableres ved at gnide eller knække planter, og smagen - kun hos ikke-giftige planter. Når du studerer udseendet, skal du være opmærksom på de morfologiske træk ved råmaterialets dele.

Mikroskopisk analyse. Bruges til at bestemme ægtheden af ​​knuste medicinske plantematerialer. For at gøre dette skal du kende den anatomiske struktur af planter som helhed og de karakteristiske egenskaber for en bestemt plante, der adskiller den fra andre planter.

Kemisk analyse. Det giver mulighed for kvalitative, mikrokemiske, histokemiske reaktioner og sublimering for at bestemme aktive eller beslægtede stoffer i råmaterialer. Det er tilrådeligt at udføre mikrokemiske reaktioner parallelt med mikroskopisk analyse. Histokemiske reaktioner udføres for at identificere specifikke forbindelser på stederne for deres lokalisering i planten. Sublimering forstås som produktion af stoffer, der let sublimeres, når de opvarmes fra plantematerialer, efterfulgt af en kvalitativ reaktion med et sublimat.

Luminescensanalyse. Dette er en metode til at studere forskellige objekter (inklusive biologiske) baseret på observation af deres luminescens. Luminescens - gløden af ​​en gas, væske eller fast stof, ikke på grund af opvarmning af kroppen, men på grund af den ikke-termiske excitation af dets atomer og molekyler. Luminescensanalyse udføres for at bestemme stofferne med luminescens i medicinske råvarer.

Kvalitetskontrol af organoterapeutiske præparater. For at kontrollere, om kvaliteten af ​​kirtler er i overensstemmelse med kravene i standarden, vælges 5% af kasser eller pakker fra hvert parti, men ikke mindre end fem sådanne pakker. Hvis kirtlerne i en af ​​de åbnede kasser eller pakker ikke opfylder kravene i den relevante standard i mindst en af ​​indikatorerne, kontrolleres hele partiet.

For enkelte typer af råvarer er der objektive (laboratorie)metoder til at vurdere dets kvalitet.

Objektivt er kvaliteten af ​​bugspytkirtlen beregnet til produktion af insulin ifølge GOST bestemt af massefraktionen af ​​fedt og massefraktionen af ​​insulin ved hjælp af passende laboratoriemetoder.

Massefraktionen af ​​fedt bestemmes af et butyrometer. Massefraktionen af ​​insulin kontrolleres efter anmodning fra forbrugeren ved en immunreaktiv metode ved hjælp af antiserum, immunglobuliner i en homogeniseret kirtel.

Kvaliteten af ​​slimhinden (epitel) i kvægets tunger kontrolleres ved at bestemme pH-værdien af ​​konserveringsmediet med epitelet og dets bakterielle kontaminering. Essensen af ​​metoden er at bestemme det samlede antal mikrober i 1 ml af et konserveringsmedium med epitel.

Kvaliteten af ​​glaslegemet i øjnene hos frosne kvæg, grise, får og geder bestemmes af det kvantitative indhold af hyaluronsyre (glucosamin) i glaslegemet. Metodens princip er baseret på bestemmelsen af ​​glucosamin i produkterne fra hyaluronsyrehydrolyse, som er en integreret del af hyaluronsyremolekylet og er direkte afhængig af dets indhold i glaslegemet.

Hypofysens biologiske aktivitet bestemmes i virkningsenheder af ACTH indeholdt i 1 mg syreacetoneret pulver (CAP) opnået fra hypofysen.

Bestemmelse af ACTH-aktivitet er baseret på dets evne til at forårsage en reduktion af lymfoidt væv, især strumakirtlen hos rotteunger. Lægemidlets virkningsenhed tages som den daglige dosis af lægemidlet, som, når det administreres i fem dage, forårsager et fald i kirtlens masse med 50 ± 5%.

Biskjoldbruskkirtlens kvalitet bestemmes af den histologiske metode. På sektioner af biskjoldbruskkirtlerne er ophobninger af epitelceller med udtalt basofil granularitet synlige. På sektioner af lymfekirtlerne er retikulært væv synligt (i form af en homogen masse), omgivet af en tæt bindeskede (kapsel), hvorfra tydeligt synlige forbindelsessnore strækker sig indad. Statsstandarden foreskriver, at en prøve på 40 kirtler ikke må indeholde mere end én lymfeknude.

Metoder til bestemmelse af kvaliteten af ​​tørre biologiske præparater. Tørre biologiske præparater har en række fordele i forhold til traditionelle flydende biologiske præparater på grund af bedre kvalitet, lavere vægt, øget holdbarhed og nem transport.

Fysiske metoder. 1. Metode til bestemmelse af vakuum. Essensen af ​​metoden ligger i evnen af ​​en højfrekvent elektrisk strøm ved høj spænding til at forårsage en glød i gasser, hvis art ændrer sig afhængigt af graden af ​​forbrænding af luften i ampullen (hætteglasset).

Prøvevalg. Prøveudtagning udføres i overensstemmelse med reglerne fastsat i de statslige standarder for tørre biologiske præparater.

Apparater og udstyr. Når de udfører testen, bruger de: et apparat af typen "D'Arsenal" eller "Tesla", et stativ til ampuller, et metalbord.

Udførelse af en test. Testforberedelse:

før testning skal du kontrollere udseendet, tætheden af ​​proppen af ​​hætteglassene, tilstedeværelsen af ​​revner, forseglingen af ​​ampullerne.

Apparatet opbevares i 10 minutter efter tænding. Testampullerne placeres i et stativ, derefter bringes en elektrode til dem i en afstand af 1 cm. Ved bestemmelse af vakuumet ved hjælp af Tesla-apparatet, jordes den ene metalelektrode på apparatet gennem et metalbord, hvorpå ampullerne lægges. ud, og den anden bringes til de testede ampuller. Eksponering ikke mere end 1 s.

Bearbejdning af resultater. Udseendet af glød inde i ampullerne med en karakteristisk knitren indikerer tilstedeværelsen af ​​et vakuum i dem.

Graden af ​​forbrænding af luft i de testede ampuller bestemmes af arten af ​​gløden af ​​gasser i de testede ampuller i overensstemmelse med følgende data.

Bestemmelse af graden af ​​sjældne luft i de testede ampuller

2. Metode til bestemmelse af fugtighed. Essensen af ​​metoden er at bestemme vægtreduktionen af ​​lægemiddelprøven, efter at den er blevet tørret i 1 time ved en temperatur på 105 °C.

Prøvevalg. Til testning vælges det nødvendige antal ampuller (hætteglas) fra forskellige emballagesteder under hensyntagen til kravene til massen af ​​prøver (i overensstemmelse med standarden).

Ved prøveudtagning kontrolleres tætheden af ​​ampullerne. I hætteglas med lyofiliseret præparat kontrolleres væggen og bunden for integritet, samt fuldstændigheden af ​​pasformen af ​​den rullede hætte og gummiprop. I tilfælde af defekter erstattes hætteglasset med et andet. Hver ampul, forseglet under vakuum, kontrolleres for lækager, før lægemidlet fjernes fra den.

Udstyr, materialer og reagenser. Under testen anvendes følgende: laboratorievægte, et laboratorietørreskab, kviksølvtermometre, en ekssikkator, glasflasker, teknisk vaseline, vandfrit calciumchlorid eller dehydreret gips eller kalcineret silicagel.

Forberedelse til testen. Tørreskabet kontrolleres med maksimum termometre for ensartet opvarmning.

Ved tørring af prøver i vejeflasker skal den nederste del af kontroltermometeret være på niveau med vejeflasker. Kontroltermometerets aflæsninger er afgørende for indstilling af temperaturen i skabet.

Vægten skal placeres på et stabilt, vibrationsfrit bord. Resultaterne af alle vejninger registreres i gram med fjerde decimal.

Bunden af ​​ekssikkatoren skal fyldes med dehydreret calciumchlorid eller gips eller silicagel. De polerede kanter af karret er let smurt ind med teknisk vaseline.

Der skal forberedes tre flasker med samme diameter og højde til hver analyse.

Udførelse af en test. Til bestemmelse af fugtindholdet anvendes tre ampuller, hvis hver af dem indeholder en prøvemasse på mindst 0,1 g. Hvis ampullen indeholder mindre end 0,1 g af et biologisk præparat, kan der anvendes to eller flere ampuller.

Den udvalgte prøve, knust til pulverform, anbringes i et jævnt lag i en forvejet flaske.

Flaskerne er installeret i et tørreskab på en hylde. Begyndelsen af ​​tørringen skal betragtes som tidspunktet for at nå en temperatur på 105 ° C i henhold til kontroltermometeret. Tørretid 60 min.

Efter tørring lukkes vejeflaskerne hurtigt med låg og overføres til en ekssikkator til afkøling til stuetemperatur, hvorefter vejeflaskerne vejes med fjerde decimal og registreres efter skemaet.

3. Metode til bestemmelse af mængden af ​​ilt. Prøvevalg. Prøveudtagning udføres i overensstemmelse med reglerne fastsat i de statslige standarder for tørre biologiske præparater.

Udstyr, materialer og reagenser. Under testen anvendes følgende: en gaskromatograf af mærket LXM-8MD eller andre lignende mærker med en termisk ledningsevnedetektor og en gaskromografisk søjle med en diameter på 3 mm og en længde på 1000 mm, en muffelovn med en opvarmningstemperatur på op til 1000 ° C, en gasflowmåler med en burette, et stopur, en medicinsk sprøjte med en kapacitet på 1 cm 3, vævede trådnet, et forstørrelsesglas, en ekssikkator, en porcelænsmørtel, en metallineal 30 cm lange molekylsigter - syntetisk zeolitkvalitet CaA, en medicinsk nål, en medicinsk gummislange med en indvendig diameter på 4,2 mm, 10 m lang, en flaske med en kapacitet 3000 cm 3 , gummiprop, silikoneolie, helium, nitrogen gas, destilleret vand.

Forberedelse til testen. Kolonneforberedelse. Syntetisk zeolit ​​knuses i en porcelænsmørtel, sigtes ud på sigter, vaskes med destilleret vand, tørres og kalcineres i en muffelovn ved en temperatur på 450...500 °C i 2 timer og afkøles derefter i en ekssikkator på gitter til værelset. temperatur.

Den kromatografiske søjle er installeret lodret og dækket med syntetisk zeolit. Søjlen er ikke fyldt op med 1 cm og tilstoppet med et net. Den fyldte søjle installeres i kromatografens termostat, og uden at være forbundet til detektoren ledes en strøm af helium eller nitrogen igennem den i 3 timer ved en temperatur på 160...180 °C. Derefter fastgøres søjlen til detektoren, og helium eller nitrogen fortsætter med at strømme gennem den, indtil nullinjens drift stopper ved detektorens maksimale følsomhed.

Kromatografen er klargjort til drift og tændt i henhold til producentens anvisninger.

Forberedelse af et hætteglas med lægemidlet til test. For at tage en prøve fra hætteglasset med lægemiddel, udlignes gastrykket i hætteglasset med atmosfærisk tryk.

Forberedelse af en medicinsk sprøjte. Et metalrør er foreløbigt installeret på sprøjtestangen, og sprøjten kontrolleres for utætheder. Med en medicinsk sprøjte med en nål kontrolleret og klargjort til gasprøvetagning gennembores et gummirør, hvorigennem helium kommer ud af kromatografens referencesøjle, og helium trækkes langsomt ind og frigives to gange med en sprøjte. For tredje gang, ved at trække helium ind i sprøjten og placere den med nålen nede, tages gasprøver fra hætteglasset med lægemidlet.

Udførelse af en test. To gasprøver udtages fra hvert hætteglas og sekventielt den ene efter den anden med et interval på 3...4 minutter injiceres i kromatografens fordamper. Prøven indføres i fordamperen ved forsigtigt at trykke fingeren på stangen. Efter 110 ... 120 s efter indførelsen af ​​prøven på kromatogrammet tegner optageren en ilttop og derefter en nitrogentop.

Bearbejdning af resultater. Beregn arealet af toppene af ilt og nitrogen. For at gøre dette måles højden og bredden af ​​toppene af ilt og nitrogen på kromatografen ved hjælp af en metallineal 30 cm lang, en forstørrelseslup og en skarpt spids blyant. Højden af ​​toppene måles fra basislinjen til toppen af ​​toppen, bredden af ​​toppen måles til halvdelen af ​​dens højde. Når du måler, skal du tage afstanden fra den indre tykkelse af spidslinjen til den ydre.

Toparealet af ilt (SO 2, mm 2) og nitrogen (5N 2, mm 2) beregnes ved hjælp af formlerne

SO 2 \u003d h 1 * b 1; SN \u003d h 2 *b 2,

hvor h 1 h 2 ~ højden af ​​ilt- og nitrogentoppe, mm; b 1 , b 2 - bredde af ilt- og nitrogentoppe, mm.

Volumenfraktionen af ​​oxygen (X, %) i hver gasprøve beregnes ved hjælp af formlen

X=SO 2 /(SO 2 + SN 2)

hvor SO 2, SN 2 er områderne med ilt- og nitrogentoppe, mm 2 .

For det endelige testresultat tages det aritmetiske gennemsnit af resultaterne af bestemmelserne i tre hætteglas med lægemidlet.

Metodens relative reducerede fejl ved et konfidensniveau P-0,95 bør ikke overstige 10 %.

bakteriologisk metode. Sterilitetskontrol. Essensen af ​​metoden ligger i den mikrobiologiske vurdering af fraværet af vækst af bakterier og svampe ved podning af præparater på næringsmedier.

Prøvevalg. Prøver udtages fra hver serie af præparater i mængden af ​​0,15 % hætteglas, men ikke mindre end fem for væske og 10 ampuller til tørre præparater.

Forberedelse til testen. Laboratorieglas koges i 15 minutter i destilleret vand, syrnes med en opløsning af saltsyre og vaskes derefter med postevand og vaskes med en børste i en opløsning indeholdende 30 g vaskepulver og 50 cm 3 vandig ammoniak pr. 1000 cm 3 af destilleret vand. Derefter vaskes opvasken grundigt først med postevand og derefter tre gange med destilleret vand, tørres og steriliseres.

Inden sterilisering placeres tallerkenerne i metalhylstre. Skåle steriliseres i en autoklave ved 0,15 MPa i 60 minutter.

Færdiglavede næringsmedier, testet for vækstegenskaber, hældes i 6...8 cm 3 (for at bestemme anaerobe 10...12 cm 3) i reagensglas, 50...60 cm 3 i 100 cm 3 hætteglas.

Prøver af tørre biologiske præparater er foropløst med et sterilt opløsningsmiddel (isotonisk natriumchloridopløsning, destilleret vand osv.).

Udførelse af en test. 1. Test for sterilitet ved hjælp af thioglycol-medium.

Fra hvert hætteglas med lægemidlet inokuleres 1 cm3 i tre reagensglas indeholdende thioglycolmedium.

To inokulerede reagensglas opbevares i en termostat i 14 dage: det ene ved en temperatur på 21 °C, det andet ved en temperatur på 37 °C.

Det tredje reagensglas opbevares i 7 dage ved en temperatur på 37 °C, og derefter laves der subkulturer på 0,5 cm 3 af det, et reagensglas hver for skrå kasein-agar, kaseinnæringsbouillon, Sabouraud-medium og 1 cm 3 for kaseinnæringsstof. bouillon under vaselineolie med kødstykker eller lever.

Overførsler til kaseinagar, kød-pepton-bouillon opbevares i yderligere 7 dage ved en temperatur på 37 °C og overføres til Sabouraud-medium - ved en temperatur på 21 °C.

Ved testning af prøver af præparater overvåges mediernes sterilitet: tre reagensglas med hvert medium opbevares i en termostat i 14 dage ved 37 °C, med Sabouraud-medium - ved en temperatur på 21 °C.

2. Test for sterilitet uden thioglycolmedium.

Fra hver prøve af præparatet udføres podning på Sabourauds flydende medium, kød-pepton agar og kød-pepton bouillon - tre reagensglas hver; på Tarozzi-mediet - to reagensglas og to hætteglas.

For at påvise aerober sås 0,5 cm 3 frø i et reagensglas og 1 ... 2 cm 3 i et hætteglas, og for at påvise anaerobe, henholdsvis 1 og 5 cm 3. Afgrøderne placeres i en termostat (ved en temperatur på 37 ° C; for Sabouraud - ved en temperatur på 21 ° C) i 7 dage (15 dage for anaerobe). Derefter gensåes (bortset fra såning på kød-pepton agar). Subkultureret på samme medie. Tåler 7 dage (15 dage for anaerobe). Sterilitetskontrol udføres.

Evaluering af resultater. Resultaterne af de primære og gentagne podninger tages i betragtning ved makroskopisk, og i tilfælde af mikroorganismevækst - mikroskopisk undersøgelse af alle afgrøder, tages de i betragtning 14 dage efter den indledende podning på et thioglycolmedium og 7 dage efter den indledende podning uden et thioglycolmedium. Mediet betragtes som sterilt, hvis der ikke observeres vækst i nogen af ​​de inokulerede rør.

I tilfælde af vækst i mindst et af de podede rør, gentages sterilitetskontrollen på det samme antal prøver, og mikroskopi af de dyrkede mikrober udføres. Udstrygningerne er Gram-farvede, hvilket bemærker morfologien.

I fravær af vækst i den gentagne kontrol betragtes lægemidlet som sterilt. I nærvær af vækst i mindst et af reagensglassene og identiteten af ​​mikrofloraen under de primære og gentagne afgrøder, anses lægemidlet for ikke-sterilt.

Hvis der påvises forskellig mikroflora under den primære og gentagne podning, og vækst kun påvises i individuelle reagensglas, inokuleres prøverne for tredje gang.

I mangel af vækst betragtes lægemidlet som sterilt. Hvis vækst påvises i mindst ét ​​reagensglas, uanset mikrofloraens art, anses lægemidlet for ikke-sterilt.

Lovmæssige krav til kvaliteten af ​​færdige doseringsformer. Doseringsformer fremstilles på fabrikker, farmaceutiske fabrikker (officielle lægemidler) og apoteker (trunk-lægemidler). Kontrol af færdige doseringsformer hos farmaceutiske virksomheder udføres i overensstemmelse med kravene i NTD (State Farmakopé, FS, FSP, GOST). I overensstemmelse med kravene i disse dokumenter skal doseringsformerne være underlagt verifikation (V. D. Sokolov, 2003).

Tabletter testes for desintegration. Medmindre andet er angivet i en privat artikel, bør tabletter desintegreres inden for 15 minutter, og overtrukne tabletter bør ikke overstige 30 minutter. Enterisk tabletter bør ikke desintegreres inden for 1 time i saltsyreopløsning, men bør desintegreres inden for 1 time i natriumbicarbonatopløsning. Styrken af ​​tabletter til slid skal være mindst 75%. Lægemidlet i tabletten skal opløses i vand i 45 minutter med mindst 75%. Gennemsnitsvægten bestemmes ved at veje 20 tabletter med en nøjagtighed på 0,001 g. Afvigelser fra gennemsnitsvægten tillades: ± 7,5 % for tabletter, der vejer 0,1 ... 0,3 g og ± 5 % for tabletter, der vejer 0,5 g og mere. Tabletterne styrer også indholdet af talkum.

Granulat - bestemme størrelsen ved hjælp af sigteanalyse. Cellediameteren skal være 0,2...3 mm, og antallet af mindre og større granula bør ikke overstige 5%. Desintegreringstesten for 0,5 g granulat er den samme som for tabletter. Desintegreringstiden bør ikke overstige 15 minutter. Bestem fugt. For at bestemme indholdet af lægemidlet udtages en prøve på mindst 10 pund granulat.

Kapsler - kontroller gennemsnitsvægten. Afvigelsen af ​​hver kapsel fra den bør ikke overstige ± 10%. Ligesom det gøres med tabletter, kontrolleres nedbrydning og opløselighed, og doseringsensartethed bestemmes for kapsler, der indeholder 0,05 g eller mindre af lægemiddelstoffet. Den kvantitative bestemmelse af medicinske stoffer udføres efter specielle metoder ved at bruge indholdet af 20 til 60 kapsler til dette formål.

Pulvere - etablere afvigelser i massen af ​​doserede pulvere. De kan være ± 15 % med en pulvervægt på op til 0,1 g; ±10% - fra 0,1 til 0,3 g; ±5% - fra 0,3 til 1; ±3 % - over 1 g.

Suppositorier - visuelt bestemme ensartethed i et langsgående snit. Gennemsnitsvægten bestemmes ved vejning med en nøjagtighed på 0,01 g, afvigelser bør ikke overstige ± 5 %. Suppositorier fremstillet på lipofile baser styres af smeltepunktet. Det må ikke overstige

37 °C. Hvis denne temperatur ikke kan etableres, bestemmes tidspunktet for fuldstændig deformation, som ikke bør være mere end 15 minutter. Suppositorier fremstillet på hydrofil basis testes for opløselighed (indikator "opløsning"). Bestem opløsningstiden ved en temperatur på (37 ± 1) ° C, som ikke bør overstige 1 time. Den kvantitative bestemmelse af medicinske stoffer udføres efter specielle metoder.

Tinkturer - bestemme alkoholindholdet eller densiteten. Indholdet af aktive stoffer bestemmes ved hjælp af specielle teknikker. Desuden bestemmes den tørre rest efter inddampning af 5 ml af tinkturen til tørhed i en flaske og tørring i 2 timer ved en temperatur på (102,5 ± 2,5) °C. I samme volumen tinktur efter brænding og kalcinering af dens blanding med 1 ml koncentreret svovlsyre bestemmes indholdet af tungmetaller.

Ekstrakter - som i tinkturer, bestemme tætheden eller indholdet af alkohol, aktive ingredienser, tungmetaller. Tørvægten af ​​resten er også fastlagt, og i tykke og tørre ekstrakter - fugtindholdet [ved tørring i en ovn ved en temperatur på (102,5 ± 2,5) ° C).

Aerosoler - mål trykket inde i cylinderen ved hjælp af en trykmåler ved stuetemperatur (hvis drivmidlet er en komprimeret gas). Tjek emballagen for utætheder. I doserede pakker bestemmes den gennemsnitlige masse af lægemidlet i en dosis, hvor afvigelsen ikke er tilladt mere end +20%. Indstil procentdelen af ​​outputtet af indholdet ved at fjerne det fra cylinderen, efterfulgt af vejning. Den kvantitative bestemmelse af stoffet udføres i overensstemmelse med kravene i private artikler i statens farmakopé. Afvigelser fra de angivne mængder bør ikke overstige ±15 %.

Salver - En almindelig test er en metode til at bestemme partikelstørrelsen af ​​et lægemiddelstof i salver. Der anvendes et mikroskop med et okulært mikrometer MOV-1.

Plaster. Sammensætningen, kvalitetsindikatorerne, testmetoderne er forskellige og er angivet i den lovgivningsmæssige dokumentation for specifikke produkter.

Øjendråber testes for sterilitet og tilstedeværelsen af ​​mekaniske urenheder.

Injicerbare doseringsformer. Injicerbare lægemiddelopløsninger administreret intravenøst ​​i store mængder kræver særlig opmærksomhed. De bruger sådanne egenskaber som udseende, herunder opløsningernes farve og gennemsigtighed, fravær af mekaniske urenheder, apyrogenicitet, sterilitet, opløsningens volumen, mængden af ​​aktivt stof i den, pH og isotonicitet af blodplasma, emballering, mærkning , og volumen af ​​påfyldning af ampuller. Normerne for tilladte afvigelser er angivet i statens farmakopé XI. Desuden bestemmes indholdet af hjælpestoffer; for nogle af dem (phenol, cresol, sulfitter, chlorbutanol) er tilladte mængder tilvejebragt (fra 0,2 til 0,5%). pH-krav varierer efter formulering, typisk mellem 3,0 og 8,0. På hver ampul (flaske) angives lægemidlets navn, dets indhold (i procent) eller aktivitet (i virkningsenheder, ED), volumen eller masse, batchnummer, udløbsdato. Alle test af injicerbare doseringsformer er reguleret af NTD.

Analysen af ​​homøopatiske lægemidler er meget vanskelig på grund af de høje fortyndinger af de medicinske stoffer. Hvis biologisk aktive stoffer er indeholdt i tinkturer, essenser, salver og andre former i fortyndinger op til 2 C (C - centesimal) eller 0,0001, adskiller deres analyse og standardisering sig praktisk talt ikke fra kvalitetskontrollen af ​​doseringsformer, der anvendes i allopatisk medicin. Lægemidler i en fortynding på 2 ... 3 C (10 -4 ... 10 -6) analyseres efter specielle koncentrationsmetoder ved hjælp af fordampning, forbrænding af stoffer, efterfulgt af bestemmelse ved en af ​​de fysisk-kemiske metoder, baseret på dets opløsning . Ved mere end 3 C fortynding (10 -6) er det nok at fastslå ægtheden af ​​lægemidlet indeholdt i en enkelt enkelt eller daglig dosis. Ved meget høje fortyndinger (op til 50 C eller 10 -10 ... 10 -100) er det umuligt at kontrollere kvaliteten af ​​homøopatiske midler ved hjælp af eksisterende metoder. For sådanne lægemidler udføres kvalitetskontrol på produktionsstadiet, strengt kontrollerende den teknologiske proces. Kvaliteten kontrolleres ved tilsætning af ingredienserne og registreres under indlæsningen. Hver ingrediens underkastes en foreløbig analyse. I alle disse tilfælde anvendes kromatografiske, fotometriske, fluorescerende og andre metoder til analyse og standardisering af homøopatiske lægemidler.

5 / 5 (stemmer: 1 )

I dag er det ret almindeligt at finde lægemidler og dummy-piller af lav kvalitet, som får forbrugeren til at tvivle på deres effektivitet. Der er visse metoder til lægemiddelanalyse, der gør det muligt at bestemme lægemidlets sammensætning, dets egenskaber med maksimal nøjagtighed, og dette vil afsløre graden af ​​lægemidlets indflydelse på menneskekroppen. Hvis du har visse klager over et lægemiddel, kan dets kemiske analyse og objektive udtalelse være bevis i enhver retssag.

Hvilke metoder til lægemiddelanalyse bruges i laboratorier?

For at fastslå de kvalitative og kvantitative egenskaber ved et lægemiddel i specialiserede laboratorier anvendes følgende metoder i vid udstrækning:

• Fysiske og fysisk-kemiske, som hjælper med at bestemme smelte- og størkningstemperaturen, densitet, sammensætning og renhed af urenheder, finder indholdet af tungmetaller.
• Kemisk, bestemmelse af tilstedeværelsen af ​​flygtige stoffer, vand, nitrogen, opløseligheden af ​​lægemidlet, dets syre, jodtal osv.
• Biologisk, så du kan teste stoffet for sterilitet, mikrobiel renhed, indholdet af toksiner.

Metoder til analyse af lægemidler vil gøre det muligt at fastslå ægtheden af ​​sammensætningen, der er erklæret af producenten, og bestemme de mindste afvigelser fra normerne og produktionsteknologien. Laboratoriet for ANO "Center for Kemisk Ekspertise" har alt det nødvendige udstyr til en nøjagtig undersøgelse af enhver form for medicin. Højt kvalificerede specialister bruger en række forskellige metoder til at analysere lægemidler og vil give en objektiv ekspertudtalelse på kortest mulig tid.

Formålet med undersøgelsen af ​​lægemidler er at fastslå lægemidlets egnethed til medicinsk brug, dvs. overholdelse af dets regulatoriske dokument for dette lægemiddel.

Farmaceutisk analyse er videnskaben om kemisk karakterisering og måling af biologisk aktive stoffer på alle produktionsstadier: fra kontrol af råmaterialer til vurdering af kvaliteten af ​​det resulterende lægemiddel, undersøgelse af dets stabilitet, etablering af udløbsdatoer og standardiseringen af ​​den færdige doseringsform. Det særlige ved farmaceutisk analyse er dens alsidighed og mangfoldighed af stoffer eller deres blandinger, herunder individuelle kemikalier, komplekse blandinger af biologiske stoffer (proteiner, kulhydrater, oligopeptider osv.). Analysemetoder skal konstant forbedres, og hvis kemiske metoder, herunder kvalitative reaktioner, var fremherskende i UP Farmakopéen, er der på nuværende tidspunkt primært anvendt fysisk-kemiske og fysiske analysemetoder.

Farmaceutisk analyse, afhængigt af opgaverne, omfatter forskellige aspekter af lægemiddelkvalitetskontrol:
1. Farmakopéanalyse;
2. Trinvis kontrol af produktionen af ​​lægemidler;
3. Analyse af individuelle lægemidler.

Den vigtigste og mest betydningsfulde er farmakopéanalysen, dvs. analyse af lægemidler for overholdelse af standarden - en farmakopémonografi eller anden ND og dermed bekræftelse af dens egnethed. Derfor kravene til høj specificitet, selektivitet, nøjagtighed og pålidelighed af analysen.

En konklusion om kvaliteten af ​​et lægemiddel kan kun drages på grundlag af en prøveanalyse (en statistisk signifikant prøve). Prøveudtagningsproceduren er angivet enten i en privat artikel eller i en generel artikel fra Global Fund X1 ed. (Udgave 2) s.15. For at teste lægemidler for overensstemmelse med kravene i regulatorisk og teknisk dokumentation, udføres flertrinsprøvetagning (prøveudtagning). Ved flertrinsprøvetagning dannes en prøve (prøve) i etaper, og produkterne i hvert trin udvælges tilfældigt i forholdsmæssige mængder fra enheder valgt i det foregående trin. Antallet af trin bestemmes af emballagetypen.

Fase 1: udvælgelse af emballageenheder (kasser, kasser osv.);
Fase 2: udvælgelse af emballageenheder i emballage (æsker, flasker, dåser osv.);
Trin 3: udvælgelse af produkter i primær emballage (ampuller, hætteglas, blister osv.).

For at beregne udvalget af antallet af produkter på hvert trin skal du bruge formlen:

hvor n- antallet af emballageenheder i denne fase.

Den specifikke prøveudtagningsprocedure er beskrevet detaljeret i GF X1-udgaven, udgave 2. I dette tilfælde anses analysen for at være pålidelig, hvis mindst fire prøver er reproducerbare.

Farmaceutiske analysekriterier

Til forskellige formål med analysen er sådanne kriterier som analysens selektivitet, følsomhed, nøjagtighed, tidspunktet for analysen, mængden af ​​teststoffet vigtige.

Analysens selektivitet er væsentlig i analysen af ​​komplekse præparater bestående af flere aktive komponenter. I dette tilfælde er analysens selektivitet meget vigtig for den kvantitative bestemmelse af hvert af stofferne.

Krav til nøjagtighed og følsomhed afhænger af genstanden og formålet med undersøgelsen. Når der testes for renhed eller urenheder, anvendes højfølsomme metoder. For trinvis produktionsstyring er tidsfaktoren brugt på analyse vigtig.

En vigtig parameter ved analysemetoden er metodens følsomhedsgrænse. Denne grænse betyder det laveste indhold, ved hvilket et givet stof kan påvises pålideligt. De mindst følsomme er kemiske analysemetoder og kvalitative reaktioner. De mest følsomme enzymatiske og biologiske metoder til at påvise enkelte makromolekyler af stoffer. Af de faktisk anvendte er de mest følsomme radiokemiske, katalytiske og fluorescerende metoder, som gør det muligt at bestemme op til 10 -9 %; følsomhed af spektrofotometriske metoder 10 -3 -10 -6%; potentiometrisk 10 -2%.

Udtrykket "analysenøjagtighed" omfatter samtidig to begreber: reproducerbarhed og korrekthed af de opnåede resultater.

Reproducerbarhed - karakteriserer spredningen af ​​analysens resultater sammenlignet med gennemsnitsværdien.

Rigtighed - afspejler forskellen mellem det faktiske og det fundne indhold af stoffet. Nøjagtigheden af ​​analysen afhænger af instrumenternes kvalitet, analytikerens erfaring mv. Nøjagtigheden af ​​analysen kan ikke være højere end nøjagtigheden af ​​den mindst nøjagtige måling. Dette betyder, at hvis titreringen er nøjagtig til ±0,2 ml plus lækagefejl er også ±0,2 ml, dvs. i alt ±0,4 ml, så når 20 ml titrant forbruges, er fejlen 0,2%. Med et fald i prøven og mængden af ​​titrant falder nøjagtigheden. Titrimetrisk analyse muliggør således bestemmelse med en relativ fejl på ± (0,2-0,3)%. Hver metode har sin egen nøjagtighed. Når du analyserer, er det vigtigt at have en forståelse af følgende begreber:

Grove fejl- er en fejlberegning af observatøren eller en overtrædelse af analysemetoden. Sådanne resultater kasseres som upålidelige.

Systematiske fejl - afspejle rigtigheden af ​​analysens resultater. De forvrænger måleresultaterne som regel i én retning med en konstant værdi. Systematiske fejl kan delvist elimineres ved at indføre korrektioner, instrumentkalibrering mv.

Tilfældige fejl - afspejle reproducerbarheden af ​​analysens resultater. De kaldes af ukontrollerede variable. Det aritmetiske gennemsnit af tilfældige fejl har en tendens til nul. Derfor er det til beregninger nødvendigt at bruge ikke resultaterne af enkeltmålinger, men gennemsnittet af flere parallelle bestemmelser.

Absolut fejl- repræsenterer forskellen mellem det opnåede resultat og den sande værdi. Denne fejl er udtrykt i de samme enheder som den værdi, der bestemmes.

Relativ fejl definition er lig med forholdet mellem den absolutte fejl og den sande værdi af den bestemte værdi. Det udtrykkes normalt som en procentdel eller en procentdel.

Værdierne af relative fejl afhænger af den metode, analysen udføres med, og hvad det analyserede stof er - et individuelt stof og en blanding af mange komponenter.

Den relative fejl i undersøgelsen af ​​individuelle stoffer ved den spektrofotometriske metode er 2-3%, ved IR-spektrofotometri - 5-12%; væskekromatografi 3-4%; potentiometri 0,3-1%. Kombinerede metoder reducerer normalt analysens nøjagtighed. Biologiske metoder er de mindst nøjagtige - deres relative fejl når 50%.

Metoder til identifikation af medicinske stoffer.

Den vigtigste indikator ved testning af lægemidler er deres identifikation eller, som det er sædvanligt i farmakopéartikler, ægtheden. Adskillige metoder bruges til at bestemme ægtheden af ​​medicinske stoffer. Alle de vigtigste og generelle er beskrevet i GF X1-udgaven, udgave 1. Historisk har hovedvægten ligget på kemisk, inkl. kvalitative farvereaktioner, der karakteriserer tilstedeværelsen af ​​visse ioner eller funktionelle grupper i organiske forbindelser, samtidig blev fysiske metoder også meget brugt. I moderne farmakopéer lægges vægten på fysisk-kemiske metoder.

Lad os fokusere på det vigtigste fysiske metoder.

En ret stabil konstant, der karakteriserer et stof, dets renhed og autenticitet er smeltepunktet. Denne indikator bruges i vid udstrækning til standardisering af stoffer af medicinske stoffer. Metoder til bestemmelse af smeltepunktet er beskrevet detaljeret i GF X1, du kan selv prøve det i laboratorieklasser. Et rent stof har et konstant smeltepunkt, men når der tilsættes urenheder, falder smeltepunktet som regel meget betydeligt. Denne effekt kaldes en blandingstest, og det er blandingstesten, der giver dig mulighed for at fastslå lægemidlets ægthed i nærværelse af en standardprøve eller en kendt prøve. Der er dog undtagelser, da racemisk sulfocamphorsyre smelter ved en højere temperatur, og de forskellige krystallinske former for indomethacin er forskellige i smeltepunkt. De der. denne metode er en af ​​de indikatorer, der karakteriserer både produktets renhed og dets ægthed.

For nogle lægemidler anvendes en sådan indikator som størkningstemperaturen. En anden indikator, der karakteriserer et stof, er destillationens kogepunkt eller temperaturgrænser. Denne indikator karakteriserer flydende stoffer, for eksempel ethylalkohol. Kogepunktet er en mindre karakteristisk indikator, det afhænger stærkt af atmosfærens tryk, muligheden for dannelse af blandinger eller azeotroper og bruges ret sjældent.

Blandt andre fysiske metoder skal det bemærkes bestemmelsen densitet, viskositet. Standardanalysemetoder er beskrevet i SP X1. Metoden, der karakteriserer lægemidlets ægthed, er også bestemmelsen af ​​dets opløselighed i forskellige opløsningsmidler. Ifølge GF X1 udg. Denne metode er karakteriseret som en egenskab, der kan tjene som en vejledende egenskab for testproduktet. Sammen med smeltepunktet er opløseligheden af ​​et stof et af de parametre, hvormed ægtheden og renheden af ​​næsten alle medicinske stoffer fastslås. Farmakopéen etablerer en omtrentlig graduering af stoffer efter opløselighed fra meget letopløselige til praktisk talt uopløselige. I dette tilfælde anses et stof for at være opløst, i hvis opløsning ingen partikler af stoffet observeres i transmitteret lys.

Fysiske og kemiske metoder til bestemmelse af ægthed.

Den mest informative med hensyn til at bestemme ægtheden af ​​stoffer er fysisk-kemiske metoder baseret på egenskaberne af stoffernes molekyler til at interagere med fysiske faktorer. Fysiske og kemiske metoder omfatter:

1. Spektralmetoder
UV-spektroskopi
Spektroskopi i synligt lys
IR-spektroskopi
Fluorescensspektroskopi
Atomabsorptionsspektroskopi
Røntgenanalysemetoder
Kernemagnetisk resonans
Røntgendiffraktionsanalyse

2. Sorptionsmetoder til analyse
Tyndtlagskromatografi
Gas-væskekromatografi
Højtydende væskekromatografi
Elektroforese
Iontoforese
Gelkromatografi

3. Masseanalysemetoder
Massespektrometri
Kromatommassespektrometri

4. Elektrokemiske analysemetoder
polarografi
Elektron paramagnetisk resonans

5. Brug af standardprøver

Lad os kort overveje de analysemetoder, der gælder i farmaci. Alle disse analysemetoder vil blive læst for dig i detaljer i slutningen af ​​december af professor V.I. Myagkikh. Nogle spektrale metoder bruges til at bestemme ægtheden af ​​medicinske stoffer. Den mest pålidelige er brugen af ​​det lavfrekvente område af IR-spektroskopi, hvor absorptionsbåndene mest pålideligt afspejler dette stof. Jeg kalder også dette område for fingeraftryksområdet. Som regel bruges sammenligning af IR-spektre taget under standardbetingelser for en standardprøve og en testprøve til at bekræfte ægtheden. Sammenfaldet af alle absorptionsbånd bekræfter lægemidlets ægthed. Brugen af ​​UV og synlig spektroskopi er mindre pålidelig, pga spektrets natur er ikke individuel og afspejler kun en bestemt kromofor i strukturen af ​​en organisk forbindelse. Atomabsorptionsspektroskopi og røntgenspektroskopi bruges til at analysere uorganiske forbindelser for at identificere kemiske grundstoffer. Kernemagnetisk resonans gør det muligt at fastslå strukturen af ​​organiske forbindelser og er en pålidelig metode til autentificering, men på grund af instrumenternes kompleksitet og de høje omkostninger bruges den meget sjældent og som regel kun til forskningsformål . Fluorescensspektroskopi kan kun anvendes på en bestemt klasse af stoffer, der fluorescerer, når de udsættes for UV-stråling. I dette tilfælde er fluorescensspektret og fluorescensexcitationsspektret ret individuelle, men afhænger stærkt af det medium, hvori det givne stof er opløst. Denne metode er mere almindeligt anvendt til kvantificering, især af små mængder, da den er en af ​​de mest følsomme.

Røntgendiffraktionsanalyse er den mest pålidelige metode til at bekræfte strukturen af ​​et stof, det giver dig mulighed for at fastslå den nøjagtige kemiske struktur af et stof, men det er simpelthen ikke egnet til strømanalyse af ægthed og bruges udelukkende til videnskabelige formål .

Analysemetoder for sorption fundet en meget bred anvendelse inden for farmaceutisk analyse. De bruges til at bestemme ægthed, tilstedeværelsen af ​​urenheder og kvantificering. Du vil få en detaljeret forelæsning om disse metoder og det udstyr, der bruges af professor V.I. Myagkikh, en regional repræsentant for Shimadzu, en af ​​hovedproducenterne af kromatografisk udstyr. Disse metoder er baseret på princippet om sorption-desorption af stoffer på visse bærere i en bærerstrøm. Afhængigt af bæreren og sorbenten er de opdelt i tyndtlagskromatografi, væskesøjle (analytisk og præparativ, inklusive HPLC), gas-væskekromatografi, gelfiltrering, iontoforese. De sidste to metoder bruges til at analysere komplekse proteinobjekter. En væsentlig ulempe ved metoderne er deres relativitet, dvs. Kromatografi kan kun karakterisere et stof og dets mængde sammenlignet med et standardstof. Det skal dog bemærkes som en væsentlig fordel - metodens høje pålidelighed og nøjagtighed, fordi. ved kromatografi skal enhver blanding adskilles i individuelle stoffer og resultatet af analysen er netop det enkelte stof.

Massespektrometriske og elektrokemiske metoder bruges sjældent til at bekræfte ægtheden.

Et særligt sted er optaget af metoder til bestemmelse af ægthed i sammenligning med en standardprøve. Denne metode bruges ret udbredt i udenlandske farmakopéer til at bestemme ægtheden af ​​komplekse makromolekyler, komplekse antibiotika, nogle vitaminer og andre stoffer indeholdende især chirale carbonatomer, da det er vanskeligt eller endda umuligt at bestemme ægtheden af ​​et optisk aktivt stof med andre metoder. En standardprøve bør udvikles og udstedes på grundlag af en udviklet og godkendt farmakopémonografi. I Rusland findes og bruges kun få standardprøver, og de såkaldte RSO'er bruges oftest til analyse - arbejdsstandardprøver, der er fremstillet umiddelbart før forsøget af kendte stoffer eller tilsvarende stoffer.

Kemiske metoder til autentificering.

Identifikation af medicinske stoffer ved kemiske metoder bruges hovedsageligt til uorganiske lægemidler, da andre metoder er oftest ikke tilgængelige, eller de kræver komplekst og dyrt udstyr. Som allerede nævnt identificeres uorganiske elementer let ved atomabsorption eller røntgenspektroskopi. Vores farmakopémonografier bruger normalt kemiske autentificeringsmetoder. Disse metoder er normalt opdelt i følgende:

Udfældningsreaktioner af anioner og kationer. Typiske eksempler er udfældningsreaktioner af natrium- og kaliumioner med henholdsvis (zincuranylacetat og vinsyre):

Sådanne reaktioner anvendes i stor variation, og de vil blive diskuteret i detaljer i et særligt afsnit af farmaceutisk kemi vedrørende uorganiske stoffer.

Redoxreaktioner.

Redox-reaktioner bruges til at reducere metaller fra oxider. For eksempel sølv fra dets formalinoxid (sølvspejlreaktion):

Oxidationsreaktionen af ​​diphenylamin er grundlaget for at teste ægtheden af ​​nitrater og nitritter:

Reaktioner af neutralisering og nedbrydning af anioner.

Carbonater og carbonater under påvirkning af mineralsyrer danner kulsyre, som nedbrydes til kuldioxid:

På samme måde nedbrydes nitritter, thiosulfater og ammoniumsalte.

Ændringer i farven på en farveløs flamme. Natriumsalte farver flammen gul, kobbergrøn, kaliumlilla, calcium murstensrød. Det er dette princip, der bruges i atomabsorptionsspektroskopi.

Nedbrydning af stoffer under pyrolyse. Metoden bruges til præparater af jod, arsen, kviksølv. Af de for tiden anvendte er reaktionen af ​​basisk vismutnitrat mest karakteristisk, som nedbrydes ved opvarmning til dannelse af nitrogenoxider:

Identifikation af organoelement medicinske stoffer.

Kvalitativ grundstofanalyse bruges til at identificere forbindelser, der indeholder arsen, svovl, vismut, kviksølv, fosfor og halogener i et organisk molekyle. Da disse grundstoffers atomer ikke er ioniseret, bruges foreløbig mineralisering til at identificere dem, enten ved pyrolyse eller igen ved pyrolyse med svovlsyre. Svovl bestemmes ved hydrogensulfid-reaktion med kaliumnitroprussid eller blysalte. Jod bestemmes også ved pyrolyse ved frigivelse af elementært jod. Af alle disse reaktioner er identifikation af arsen af ​​interesse, ikke så meget som et lægemiddel - de bruges praktisk talt ikke, men som en metode til at overvåge urenheder, men mere om det senere.

Test af ægtheden af ​​organiske lægemidler. De kemiske reaktioner, der bruges til at teste ægtheden af ​​organiske lægemidler, kan opdeles i tre hovedgrupper:
1. Generelle kemiske reaktioner af organiske forbindelser;
2. Reaktioner ved dannelse af salte og komplekse forbindelser;
3. Reaktioner brugt til at identificere organiske baser og deres salte.

Alle disse reaktioner er i sidste ende baseret på principperne for funktionel analyse, dvs. det reaktive center af molekylet, som, når det reagerer, giver den passende respons. Oftest er dette en ændring i nogle egenskaber ved et stof: farve, opløselighed, aggregeringstilstand osv.

Lad os overveje nogle eksempler på brugen af ​​kemiske reaktioner til identifikation af medicinske stoffer.

1. Reaktioner af nitrering og nitrosering. De bruges ret sjældent, for eksempel til at identificere phenobarbital, phenacetin, dicain, selvom disse lægemidler næsten aldrig bruges i medicinsk praksis.

2. Diazotisering og azokoblingsreaktioner. Disse reaktioner bruges til at åbne primære aminer. Diazotiseret amin kombineres med beta-naphthol for at give en karakteristisk rød eller orange farve.

3. Halogeneringsreaktioner. Bruges til at åbne alifatiske dobbeltbindinger - når bromvand tilsættes, tilsættes brom til dobbeltbindingen, og opløsningen bliver farveløs. En karakteristisk reaktion for anilin og phenol er, at når de behandles med bromvand, dannes et tribromderivat, som udfældes.

4. Kondensationsreaktioner af carbonylforbindelser. Reaktionen består i kondensation af aldehyder og ketoner med primære aminer, hydroxylamin, hydraziner og semicarbazid:

De resulterende azomethiner (eller Schiff-baser) har en karakteristisk gul farve. Reaktionen bruges til at identificere for eksempel sulfonamider. Det anvendte aldehyd er 4-dimethylaminobenzaldehyd.

5. Oxidative kondensationsreaktioner. Processen med oxidativ spaltning og dannelsen af ​​azomethinfarvestof ligger til grund ninhydrin reaktion. Denne reaktion er meget udbredt til opdagelse og fotokolorimetrisk bestemmelse af α- og β-aminosyrer, i nærværelse af hvilke der fremkommer en intens mørkeblå farve. Det skyldes dannelsen af ​​et substitueret salt af diketohydrindyliden diketohydramin, et kondensationsprodukt af overskydende ninhydrin og reduceret ninhydrin med ammoniak frigivet under oxidationen af ​​testaminosyren:

For at åbne phenoler bruges reaktionen af ​​dannelsen af ​​triarylmethanfarvestoffer. Så phenoler, der interagerer med formaldehyd, danner farvestoffer. Lignende reaktioner omfatter interaktionen af ​​resorcinol med phthalsyreanhydrid, hvilket fører til dannelsen af ​​et fluorescerende farvestof - fluorescein.

Mange andre reaktioner bruges også.

Af særlig interesse er reaktioner med dannelse af salte og komplekser. Uorganiske salte af jern (III), kobber (II), sølv, kobolt, kviksølv (II) og andre til test af ægtheden af ​​organiske forbindelser: carboxylsyrer, herunder aminosyrer, derivater af barbitursyre, phenoler, sulfonamider, nogle alkaloider. Dannelsen af ​​salte og komplekse forbindelser sker i henhold til det generelle skema:

R-COOH + MX = R-COOM + HX

Kompleksdannelsen af ​​aminer forløber på samme måde:

R-NH2 + X = R-NH2X

Et af de mest almindelige reagenser i farmaceutisk analyse er en opløsning af jern(III)chlorid. Interaktion med phenoler, det danner en farvet opløsning af phenoxider, de er farvet blå eller lilla. Denne reaktion bruges til at opdage phenol eller resorcinol. Metasubstituerede phenoler danner dog ikke farvede forbindelser (thymol).

Kobbersalte danner komplekse forbindelser med sulfonamider, koboltsalte med barbiturater. Mange af disse reaktioner bruges også til kvantitativ bestemmelse.

Identifikation af organiske baser og deres salte. Denne gruppe af metoder bruges oftest i færdige former, især i undersøgelsen af ​​løsninger. Så salte af organiske aminer, når alkalier tilsættes, danner et bundfald af en base (f.eks. en opløsning af papaverinhydrochlorid) og omvendt giver salte af organiske syrer, når en mineralsyre tilsættes, et bundfald af en organisk forbindelse (for eksempel natriumsalicylat). For at identificere organiske baser og deres salte bruges de såkaldte udfældningsreagenser i vid udstrækning. Der kendes mere end 200 udfældningsreagenser, som danner vanduopløselige simple eller komplekse salte med organiske forbindelser. De mest almindeligt anvendte løsninger findes i andet bind af SP 11. udgave. Et eksempel er:
Scheiblers reagens - phosphowolframsyre;
Picrinsyre
Stynsyre
Picramsyre

Alle disse reagenser bruges til udfældning af organiske baser (for eksempel nitroxolin).

Det skal bemærkes, at alle disse kemiske reaktioner bruges til identifikation af medicinske stoffer ikke af sig selv, men i kombination med andre metoder, oftest fysisk-kemiske, såsom kromatografi, spektroskopi. Generelt er det nødvendigt at være opmærksom på, at problemet med ægtheden af ​​medicinske stoffer er et nøgleproblem, fordi denne kendsgerning bestemmer lægemidlets harmløshed, sikkerhed og effektivitet, så denne indikator skal gives stor opmærksomhed, og det er ikke nok at bekræfte ægtheden af ​​stoffet med én metode.

Generelle krav til renhedstest.

En anden lige så vigtig indikator for kvaliteten af ​​et lægemiddel er renhed. Alle lægemidler, uanset fremstillingsmetoden, er testet for renhed. Dette bestemmer indholdet af urenheder i præparatet. Det er betinget muligt at opdele urenheder i to grupper: den første, urenheder, der har en farmakologisk virkning på kroppen; den anden, urenheder, der angiver graden af ​​oprensning af stoffet. Sidstnævnte påvirker ikke lægemidlets kvalitet, men reducerer i store mængder dets dosis og reducerer følgelig lægemidlets aktivitet. Derfor sætter alle farmakopéer visse grænser for disse urenheder i lægemidler. Således er hovedkriteriet for lægemidlets gode kvalitet fraværet af urenheder, hvilket er umuligt af natur. Konceptet om fravær af urenheder er forbundet med detektionsgrænsen for en eller anden metode.

De fysiske og kemiske egenskaber af stoffer og deres opløsninger giver en omtrentlig idé om tilstedeværelsen af ​​urenheder i lægemidler og regulerer deres egnethed til brug. Derfor, for at vurdere god kvalitet, sammen med etablering af ægthed og bestemmelse af det kvantitative indhold, udføres en række fysiske og kemiske tests for at bekræfte graden af ​​dets renhed:

Gennemsigtighed og grad af turbiditet udføres ved sammenligning med en turbiditetsstandard, og transparens bestemmes ved sammenligning med et opløsningsmiddel.

Kromaticitet. En ændring i graden af ​​farve kan skyldes:
a) tilstedeværelsen af ​​en fremmed farvet urenhed;
b) en kemisk ændring i selve stoffet (oxidation, interaktion med Me +3 og +2 eller andre kemiske processer, der opstår med dannelsen af ​​farvede produkter. F.eks.

Resorcinol bliver gul under opbevaring på grund af oxidation under påvirkning af atmosfærisk oxygen til dannelse af quinoner. I nærværelse af for eksempel jernsalte får salicylsyre en lilla farve på grund af dannelsen af ​​jernsalicylater.

Farvevurdering udføres ved at sammenligne hovederfaringen med farvestandarder, og farveløshed bestemmes ved sammenligning med et opløsningsmiddel.

Meget ofte bruges en test til at påvise urenheder af organiske stoffer, baseret på deres interaktion med koncentreret svovlsyre, som kan fungere som et oxiderende eller dehydrerende middel. Som et resultat af sådanne reaktioner dannes farvede produkter.Intensiteten af ​​den resulterende farve bør ikke overstige den tilsvarende farvestandard.

Bestemmelse af graden af ​​hvidhed af pulverformige lægemidler– fysisk metode, først inkluderet i GF X1. Graden af ​​hvidhed (nuance) af faste medicinske stoffer kan vurderes ved forskellige instrumentelle metoder baseret på de spektrale karakteristika af lyset, der reflekteres fra prøven. For at gøre dette bruges reflektanser, når prøven belyses med hvidt lys opnået fra en speciel kilde, med en spektralfordeling eller passeret gennem lysfiltre (med en transmission maks. 614 nm (rød) eller 439 nm (blå)). Du kan også måle reflektansen af ​​lys, der passerer gennem et grønt filter.

En mere nøjagtig vurdering af hvidheden af ​​medicinske stoffer kan udføres ved hjælp af reflektionsspektrofotometre. Værdien af ​​graden af ​​hvidhed og graden af ​​lyshed er karakteristika for kvaliteten af ​​hvide og hvide med nuancer af medicinske stoffer. Deres tilladte grænser er reguleret i private artikler.

Bestemmelse af surhedsgrad, alkalinitet, pH.

Ændringen i disse indikatorer skyldes:
a) en ændring i den kemiske struktur af selve lægemidlet:

b) lægemidlets interaktion med beholderen, for eksempel overskridelse af de tilladte grænser for alkalinitet i en novokainopløsning på grund af glasudvaskning;
c) absorption af gasformige produkter (CO 2 , NH 3) fra atmosfæren.

Bestemmelse af kvaliteten af ​​lægemidler i henhold til disse indikatorer udføres på flere måder:

a) ved at ændre farven på indikatoren, for eksempel, bestemmes en blanding af mineralsyrer i borsyre af methylrød, som ikke ændrer farve fra virkningen af ​​svag borsyre, men bliver lyserød, hvis den indeholder urenheder af mineral syrer.

b) titrimetrisk metode - for eksempel for at fastlægge den tilladte grænse for indholdet af iodhydridsyre dannet under opbevaring af en 10% alkoholopløsning af I 2, udføres titrering med alkali (ikke mere end 0,3 ml 0,1 mol / l NaOH efter volumen af ​​titranten). (Formaldehydopløsning - titreret med alkali i nærvær af phenolphtalein).

I nogle tilfælde indstiller Global Fund mængden af ​​titrant for at bestemme surhedsgraden eller alkaliniteten.

Nogle gange tilsættes to titrerede opløsninger efter hinanden: først en syre og derefter en base.

c) ved at bestemme pH-værdien - for en række lægemidler (og nødvendigvis for alle injektionsopløsninger) i henhold til NTD, er det påtænkt at bestemme pH-værdien.

Teknikker til fremstilling af et stof i undersøgelsen af ​​surhedsgrad, alkalinitet, pH

1. Fremstilling af en opløsning af en vis koncentration specificeret i NTD (for stoffer, der er opløselige i vand)
2. Til dem, der er uopløselige i vand, fremstilles en suspension af en vis koncentration, og filtratets syre-base egenskaber bestemmes.
3. For flydende præparater, der er ublandbare med vand, udføres omrøring med vand, derefter adskilles det vandige lag, og dets syre-base egenskaber bestemmes.
4. For uopløselige faste stoffer og væsker kan bestemmelsen udføres direkte i suspension (ZnO)

pH-værdien ca. (op til 0,3 enheder) kan bestemmes ved hjælp af indikatorpapir eller en universel indikator.

Den kolorimetriske metode er baseret på indikatorernes egenskaber til at ændre deres farve ved bestemte pH-værdier. For at udføre testene anvendes bufferopløsninger med en konstant koncentration af hydrogenioner, der adskiller sig fra hinanden med en pH-værdi på 0,2. Til en række af sådanne opløsninger og til testopløsningen tilsættes den samme mængde (2-3 dråber) af indikatoren. Ifølge farvesammenfaldet med en af ​​bufferopløsningerne bedømmes pH-værdien af ​​mediet i testopløsningen.

Bestemmelse af flygtige stoffer og vand.

Flygtige stoffer kan trænge ind i lægemidler enten på grund af dårlig rensning fra opløsningsmidler eller mellemprodukter, eller som følge af ophobning af nedbrydningsprodukter. Vand i det medicinske stof kan være indeholdt i form af kapillær, absorberet bundet, kemisk bundet (hydreret og krystallinsk) eller frit.

Tørring, destillation og titrering med Fischers opløsning bruges til at bestemme flygtige stoffer og vand.

tørremetode. Metoden bruges til at bestemme vægttabet ved tørring. Tab kan skyldes indholdet af hygroskopisk fugt og flygtige stoffer i stoffet. Tørret på flaske til konstant vægt ved en bestemt temperatur. Oftere holdes stoffet ved en temperatur på 100-105 ºС, men betingelserne for at tørre og bringe til en konstant masse kan være anderledes.

Bestemmelsen af ​​flygtige stoffer kan for nogle produkter udføres ved antændelsesmetoden. Stoffet opvarmes i en digel, indtil de flygtige stoffer er helt fjernet. øg derefter gradvist temperaturen indtil fuldstændig calcinering ved rød varme. F.eks. regulerer GPC bestemmelsen af ​​natriumcarbonaturenheder i det medicinske natriumbicarbonatstof ved kalcineringsmetoden. Natriumbicarbonat nedbrydes til natriumcarbonat, kuldioxid og vand:

Teoretisk set er vægttabet 36,9%. Ifølge GPC skal massetabet være mindst 36,6 %. Forskellen mellem det teoretiske og specificerede i GPC-massetabet bestemmer den tilladte grænse for natriumcarbonaturenheder i stoffet.

destillationsmetode i GF 11 kaldes "Definition af vand", det giver dig mulighed for at bestemme hygroskopisk vand. Denne metode er baseret på den fysiske egenskab af dampene af to ublandbare væsker. En blanding af vand og et organisk opløsningsmiddel destillerer ved en lavere temperatur end nogen af ​​disse væsker. GPC1 anbefaler at bruge toluen eller xylen som det organiske opløsningsmiddel. Vandindholdet i teststoffet bestemmes af dets volumen i beholderen efter afslutningen af ​​destillationsprocessen.

Titrering med Fishers reagens. Metoden gør det muligt at bestemme det samlede indhold af både frit og krystallinsk vand i organiske, uorganiske stoffer, opløsningsmidler. Fordelen ved denne metode er hastigheden af ​​udførelse og selektivitet med hensyn til vand. Fishers opløsning er en opløsning af svovldioxid, jod og pyridin i methanol. Blandt ulemperne ved metoden, ud over behovet for streng overholdelse af tæthed, er umuligheden af ​​at bestemme vand i nærværelse af stoffer, der reagerer med komponenterne i reagenset.

Ask definition.

Askeindholdet skyldes mineralske urenheder, der optræder i organiske stoffer i processen med at opnå hjælpematerialer og udstyr fra de oprindelige produkter (primært metalkationer), dvs. karakteriserer tilstedeværelsen af ​​uorganiske urenheder i organiske stoffer.

men) total aske- bestemmes af resultaterne af forbrænding (aske, mineralisering) ved høj temperatur, karakteriserer summen af ​​alle uorganiske stoffer-urenheder.

Aske sammensætning:
Carbonater: CaCO 3, Na 2 CO 3, K 2 CO 3, PbCO 3
Oxider: CaO, PbO
Sulfater: CaSO4
Chlorider: CaCl2
Nitrater: NaNO3

Ved indhentning af medicin fra plantematerialer kan mineralske urenheder være forårsaget af støvforurening af planter, optagelse af sporstoffer og uorganiske forbindelser fra jord, vand mv.

b) Aske uopløselig i saltsyre, opnået efter behandling af total aske med fortyndet HCl. Askens kemiske sammensætning er tungmetalklorider (AgCl, HgCl 2, Hg 2 Cl 2), dvs. meget giftige urenheder.

i) sulfataske- Sulfataske bestemmes i vurderingen af ​​den gode kvalitet af mange organiske stoffer. Karakteriserer urenheder Mn + n i en stabil sulfatform. Den resulterende sulfataske (Fe 3 (SO 4) 2, PbSO 4, CaSO 4) anvendes til den efterfølgende bestemmelse af tungmetalurenheder.

Urenheder af uorganiske ioner - C1 -, SO 4 -2, NH 4 +, Ca +2, Fe +3 (+2) , Pv +2, As +3 (+5)

Urenheder:
a) urenheder af giftig karakter (en blanding af CN - i jod),
b) har en antagonistisk virkning (Na og K, Mg og Ca)

Fraværet af urenheder, der ikke er tilladt i det medicinske stof, bestemmes af en negativ reaktion med de passende reagenser. Sammenligning i dette tilfælde udføres med en del af opløsningen, hvortil alle reagenser tilsættes, undtagen den vigtigste, der åbner denne urenhed (kontroleksperiment). En positiv reaktion indikerer tilstedeværelsen af ​​en urenhed og den dårlige kvalitet af lægemidlet.

Tilladte urenheder - urenheder, der ikke påvirker den farmakologiske virkning, og hvis indhold er tilladt i små mængder fastsat af NTD.

For at fastlægge den tilladte grænse for indholdet af ionurenheder i lægemidler anvendes referenceopløsninger, der indeholder den tilsvarende ion i en bestemt koncentration.

Nogle medicinske stoffer testes for tilstedeværelsen af ​​urenheder ved titrering, for eksempel bestemmelse af urenheden af ​​norsulfazol i lægemidlet fthalazol. Indblandingen af ​​norsulfazol i phthalazol bestemmes kvantitativt ved nitritometrisk. Titrering af 1 g phthalazol bør ikke forbruge mere end 0,2 ml 0,1 mol/l NaNO 2 .

Generelle krav til reaktioner, der anvendes i test for acceptable og uacceptable urenheder:
1. følsomhed,
2. specificitet,
3. reproducerbarhed af den anvendte reaktion.

Resultaterne af reaktioner, der forløber med dannelsen af ​​farvede produkter, observeres i reflekteret lys på en mat hvid baggrund, og hvide præcipitater i form af uklarhed og opalescens observeres i transmitteret lys på en sort baggrund.

Instrumentelle metoder til bestemmelse af urenheder.

Med udviklingen af ​​analysemetoder er kravene til renhed af lægemidler og doseringsformer konstant stigende. I moderne farmakopéer, sammen med de overvejede metoder, anvendes forskellige instrumentelle metoder baseret på stoffernes fysisk-kemiske, kemiske og fysiske egenskaber. Brugen af ​​UV og synlig spektroskopi giver sjældent positive resultater, og dette skyldes det faktum, at strukturen af ​​urenheder, især organiske lægemidler, som regel. Det er tæt på selve lægemidlets struktur, så absorptionsspektrene adskiller sig lidt, og urenhedskoncentrationen er normalt titusind gange lavere end hovedstoffets, hvilket gør differentialanalysemetoder uegnede og giver mulighed for kun at estimere urenheden ca. , altså som det almindeligvis kaldes semi-kvantitativt. Resultaterne er noget bedre, hvis et af stofferne, især urenheden, danner en kompleks forbindelse, mens den anden ikke gør det, så adskiller spektrenes maksima sig væsentligt, og det er allerede muligt at bestemme urenhederne kvantitativt.

I de senere år er IR-Fourier-instrumenter dukket op hos virksomheder, der gør det muligt at bestemme både indholdet af hovedstoffet og urenheder, især vand, uden at ødelægge prøven, men deres anvendelse er begrænset af de høje omkostninger ved instrumenter og manglen på standardiseret analyse metoder.

Fremragende urenhedsresultater er mulige, når urenheden fluorescerer under UV-lys. Nøjagtigheden af ​​sådanne assays er meget høj, ligesom deres følsomhed.

Bred anvendelse til test for renhed og kvantitativ bestemmelse af urenheder både i medicinske stoffer (stoffer) og i doseringsformer, hvilket måske ikke er mindre vigtigt, fordi. mange urenheder dannes under opbevaring af lægemidler, opnået ved kromatografiske metoder: HPLC, TLC, GLC.

Disse metoder gør det muligt at bestemme urenheder kvantitativt, og hver af urenhederne individuelt, i modsætning til andre metoder. Metoderne til HPLC og GLC kromatografi vil blive diskuteret detaljeret i et foredrag af prof. Myagkikh V.I. Vi vil kun fokusere på tyndtlagskromatografi. Metoden med tyndtlagskromatografi blev opdaget af den russiske videnskabsmand Tsvet og eksisterede i begyndelsen som kromatografi på papir. Tyndtlagskromatografi (TLC) er baseret på forskellen i bevægelseshastighederne for komponenterne i den analyserede blanding i et fladt tyndt lag af sorbenten, når opløsningsmidlet (eluenten) bevæger sig igennem det. Sorbenter er silicagel, aluminiumoxid, cellulose. Polyamid, eluenter - organiske opløsningsmidler af forskellig polaritet eller deres blandinger med hinanden og nogle gange med opløsninger af syrer eller alkalier og salte. Adskillelsesmekanismen skyldes fordelingskoefficienterne mellem sorbenten og væskefasen af ​​det undersøgte stof, som igen er forbundet med mange, herunder stoffernes kemiske og fysisk-kemiske egenskaber.

I TLC dækkes overfladen af ​​en aluminium- eller glasplade med en sorbentsuspension, tørres i luft og aktiveres for at fjerne spor af opløsningsmiddel (fugt). I praksis anvendes normalt kommercielt fremstillede plader med et fast lag af sorbent. Dråber af den analyserede opløsning med et volumen på 1-10 μl påføres det sorberende lag. Kanten af ​​pladen nedsænkes i opløsningsmidlet. Forsøget udføres i et specielt kammer - en glasbeholder, lukket med et låg. Opløsningsmidlet bevæger sig gennem laget under påvirkning af kapillærkræfter. Samtidig adskillelse af flere forskellige blandinger er mulig. For at øge separationseffektiviteten anvendes multipel eluering enten i den vinkelrette retning med den samme eller en anden eluent.

Efter afslutningen af ​​processen tørres pladen i luft, og komponenternes kromatografiske zoner indstilles på forskellige måder, for eksempel ved bestråling med UV-stråling, ved sprøjtning med farvereagenser og holdes i joddamp. På det resulterende fordelingsmønster (kromatogram) er de kromatografiske zoner af blandingskomponenterne arrangeret i form af pletter i overensstemmelse med deres sorberbarhed i dette system.

Placeringen af ​​de kromatografiske zoner på kromatogrammet er karakteriseret ved værdien af ​​Rf. som er lig med forholdet mellem den vej li gennemløbet af den i-te komponent fra startpunktet til banen Vп R f = l i / l.

Værdien af ​​Rf afhænger af fordelingskoefficienten (adsorption) K і og forholdet mellem volumenerne af de mobile (V p) og stationære (V n) faser.

Adskillelse i TLC påvirkes af en række faktorer: elueringsmidlets sammensætning og egenskaber, sorptionsmidlets beskaffenhed, finhed og porøsitet, temperatur, fugtighed, størrelsen og tykkelsen af ​​sorbentlaget og kammerets dimensioner. Standardisering af eksperimentelle forhold tillader indstilling af Rf med en relativ standardafvigelse på 0,03.

Identifikation af komponenterne i blandingen udføres ved værdierne af Rf. Den kvantitative bestemmelse af stoffer i zonerne kan udføres direkte på det sorberende lag af området af den kromatografiske zone, fluorescensintensiteten af ​​komponenten eller dens kombination med et passende reagens ved radiokemiske metoder. Automatiske scanningsinstrumenter bruges også til at måle absorption, transmission, reflektion af lys eller radioaktivitet af kromatografiske zoner. De adskilte zoner kan fjernes fra pladen sammen med sorbentlaget, komponenten kan desorberes i opløsningsmidlet, og opløsningen kan analyseres spektrofotometrisk. Ved hjælp af TLC kan stoffer bestemmes i mængder fra 10 -9 til 10 -6; bestemmelsesfejlen er ikke mindre end 5-10%.