Ravimianalüüsi füüsikalis-keemilised meetodid. Ravimite kvaliteedi uuring Ravimite analüüsimeetodid GF näidete järgi

Tõenduspõhise meditsiini põhimõtete laialdane kasutuselevõtt kliinilises praktikas on suuresti tingitud majanduslikust aspektist. Rahaliste vahendite õige jaotamine sõltub sellest, kui veenvad on teaduslikud andmed diagnoosi-, ravi- ja ennetusmeetodite kliinilise ja kulutõhususe kohta. Kliinilises praktikas tuleks konkreetseid otsuseid langetada mitte niivõrd isikliku kogemuse või ekspertarvamuse, kuivõrd rangelt tõestatud teaduslike andmete põhjal. Tähelepanu tuleks pöörata mitte ainult mõttetusele, vaid ka tõenduspõhiste tõendite puudumisele erinevate ravi- ja ennetusmeetodite kasutamise kasulikkuse kohta. Praegu on see säte eriti oluline, kuna kliinilisi uuringuid rahastavad peamiselt meditsiinikaupade ja -teenuste tootjad.

"Tõenduspõhise meditsiini" või "tõenduspõhise meditsiini" kontseptsiooni pakkusid välja Kanada teadlased Toronto Mac Masteri ülikoolist 1990. aastal. Tõenduspõhine meditsiin ei ole uus teadus, vaid pigem uus lähenemine, suund või tehnoloogia teadusinfo kogumiseks, analüüsimiseks, kokkuvõtmiseks ja tõlgendamiseks. Vajadus tõenduspõhise meditsiini järele on tekkinud eelkõige seoses teadusinformatsiooni mahu suurenemisega, eelkõige kliinilise farmakoloogia vallas. Igal aastal võetakse kliinilisse praktikasse üha rohkem uusi ravimeid. Neid uuritakse aktiivselt paljudes kliinilistes uuringutes, mille tulemused on sageli mitmetähenduslikud ja mõnikord isegi vastupidised. Saadud teabe kasutamiseks tuleb seda mitte ainult hoolikalt analüüsida, vaid ka kokkuvõtet teha.

Uute ravimite ratsionaalseks kasutamiseks, nende maksimaalse terapeutilise toime saavutamiseks ja nende kõrvaltoimete ennetamiseks on vaja juba testimisetapis hankida ravimi põhjalik kirjeldus, andmed kõigi selle ravi- ja võimalike negatiivsete omaduste kohta. Üks peamisi viise uute ravimite saamiseks on bioloogiliselt aktiivsete ainete sõelumine. Tuleb märkida, et selline uute ravimite otsimise ja loomise viis on väga aeganõudev - keskmiselt langeb üks tähelepanu vääriv ravim 5-10 tuhandele uuritud ühendile. Sõelumise ja juhuslike vaatluste abil leiti väärtuslikke ravimeid, mis jõudsid meditsiinipraktikasse. Juhuslikkus ei saa aga olla uute ravimite valikul peamine põhimõte. Teaduse arenedes sai selgeks, et ravimite loomisel tuleb lähtuda elutähtsates protsessides osalevate bioloogiliselt aktiivsete ainete tuvastamisest, erinevate haiguste tekke aluseks olevate patofüsioloogiliste ja patokeemiliste protsesside uurimisest, samuti farmakoloogilise toime mehhanismide süvauuringud. Biomeditsiiniteaduste saavutused võimaldavad järjest enam läbi viia parendatud omaduste ja teatud farmakoloogilise aktiivsusega ainete suunatud sünteesi.

Ainete bioloogilise aktiivsuse prekliinilised uuringud jagunevad tavaliselt farmakoloogiliseks ja toksikoloogiliseks. Selline jaotus on tingimuslik, kuna need uuringud on üksteisest sõltuvad ja põhinevad samadel põhimõtetel. Ravimühendite ägeda mürgisuse uuringu tulemused annavad teavet järgnevateks farmakoloogilisteks uuringuteks, mis omakorda määravad aine kroonilise toksilisuse uuringu intensiivsuse ja kestuse.

Farmakoloogiliste uuringute eesmärk on määrata ravimi terapeutiline toime, samuti selle mõju organismi peamistele anatoomilistele ja füsioloogilistele süsteemidele. Aine farmakodünaamika uurimise käigus ei tuvastata mitte ainult selle spetsiifilist aktiivsust, vaid ka võimalikke farmakoloogilise toimega seotud kõrvalreaktsioone. Uuritava ravimi mõju haigetele ja tervetele organismidele võib erineda, seetõttu tuleks vastavate haiguste või patoloogiliste seisundite mudelitel läbi viia farmakoloogilised testid.

Toksikoloogilistes uuringutes tehakse kindlaks ravimite võimaliku kahjustava toime olemus ja raskusaste katseloomadele. Toksikoloogilistes uuringutes on kolm etappi:

aine ägeda mürgisuse uuring ühe süstiga;

ühendi kroonilise toksilisuse määramine, mis hõlmab ravimi korduvat kasutamist 1 aasta ja mõnikord rohkem;

ravimi spetsiifilise toksilisuse määramine - onkogeensus, mutageensus, embrüotoksilisus, sealhulgas teratogeensed toimed, sensibiliseerivad omadused, samuti võime põhjustada ravimisõltuvust.

Uuringuravimi kahjustava toime uuring katseloomade organismile võimaldab välja selgitada, millised elundid ja koed on selle aine suhtes kõige tundlikumad ning millele tuleks kliinilistes uuringutes erilist tähelepanu pöörata.

Kliiniliste uuringute eesmärk on hinnata uue farmakoloogilise aine terapeutilist või profülaktilist efektiivsust ja talutavust, määrata selle kasutamiseks kõige ratsionaalsemad annused ja režiimid, samuti võrrelda seda olemasolevate ravimitega. Kliiniliste uuringute tulemuste hindamisel tuleks arvesse võtta järgmisi tunnuseid: kontrollrühma olemasolu, patsientide kaasamise ja väljajätmise selged kriteeriumid, patsientide kaasamine uuringutesse enne ravi valimist, juhuslik (pime) ravi valik. , piisav randomiseerimismeetod, pimekontroll, ravitulemuste pime hindamine, teave tüsistuste ja kõrvaltoimete kohta, teave patsientide elukvaliteedi kohta, teave uuringust välja langenud patsientide arvu kohta, piisav statistiline analüüs, mis näitab kasutatud tekstide ja programmide nimetused, statistiline võimsus, teave tuvastatud efekti suuruse kohta.

Erinevate ravimirühmade kliiniliste uuringute programmid võivad oluliselt erineda. Siiski tuleb alati kajastada mõningaid olulisi sätteid. Testi eesmärgid ja eesmärgid tuleks selgelt välja tuua; määrata kindlaks patsientide valiku kriteeriumid; näidata patsientide põhi- ja kontrollrühma jaotamise meetod ning patsientide arv igas rühmas; ravimi efektiivsete annuste määramise meetod, uuringu kestus; kontrollmeetod (avatud, pime, topelt jne), võrdlusravim ja platseebo, uuritavate ravimite toime kvantitatiivse analüüsi meetodid (registreerimisele kuuluvad näitajad); staatilise andmetöötluse meetodid.

Ravimeetodeid käsitlevate publikatsioonide hindamisel tuleb meeles pidada, et patsientide uuringust väljaarvamise kriteeriume täpsustatakse üsna sageli ja kaasamise kriteeriume on vähem levinud. Kui pole selge, millistel patsientidel ravimit uuriti, on raske hinnata saadud andmete teabesisu. Enamik uuringuid viiakse läbi ülikoolide spetsialiseeritud haiglates või uurimiskeskustes, kus patsiendid loomulikult erinevad linnaosa kliinikute patsientidest. Seetõttu tehakse pärast esmaseid katsetusi järjest rohkem uuringuid. Esiteks - mitmekeskuseline, kui erinevate haiglate kaasamise ja nende kõigi ambulatoorsed omadused on silutud. Seejärel avage. Iga etapiga suureneb kindlustunne, et uurimistulemusi saab rakendada igas haiglas.

Uuritava ravimi annuse ja režiimi kehtestamise küsimus on väga oluline ja keeruline. On ainult kõige üldisemad soovitused, peamiselt alustada väikese annusega, mida suurendatakse järk-järgult kuni soovitud või kõrvaltoime saavutamiseni. Uuritava ravimi ratsionaalsete annuste ja režiimide väljatöötamisel on soovitav kindlaks määrata selle terapeutilise toime ulatus, vahemik minimaalse ja maksimaalse ohutu terapeutilise annuse vahel. Uuritava ravimi kasutamise kestus ei tohiks ületada loomkatsete toksikoloogiliste testide kestust.

Uute ravimite kliiniliste uuringute käigus eristatakse 4 omavahel seotud faasi (etappi).

Esimeste kliiniliste uuringute etappi nimetatakse "nägimiseks" või "kliinilis-farmakoloogiliseks". Selle eesmärk on selgitada välja uuritava ravimi talutavus ja kas sellel on ravitoime.

II faasis viiakse kliinilised uuringud läbi 100-200 patsiendiga. Vajalikuks tingimuseks on kontrollrühma olemasolu, mis ei erine koostiselt ja suuruselt oluliselt põhirühmast. Katserühma (peamise) ja kontrollrühma patsiendid peaksid olema samad nii soo, vanuse, esialgse taustaravi osas (soovitav on see lõpetada 2-4 nädalat enne uuringu algust). Rühmad moodustatakse juhuslikult juhuslike arvude tabelite abil, milles igal numbril või numbrikombinatsioonil on võrdne valikutõenäosus. Randomiseerimine ehk juhuslik jaotus on peamine viis võrdlusrühmade võrreldavuse tagamiseks.

Kliinilistes uuringutes püütakse uusi ravimeid võrrelda platseeboga, mis võimaldab hinnata ravi tegelikku efektiivsust, näiteks selle mõju patsientide elueale võrreldes ravi puudumisega. Topeltpimemeetodi vajaduse määrab asjaolu, et kui arstid teavad, millist ravi patsient saab (aktiivravim või platseebo), siis võivad nad tahtmatult soovmõtleda.

Vajalik tingimus piisavate kliiniliste uuringute läbiviimiseks on randomiseerimine. Arvestusest tuleb koheselt välja jätta artiklid uuringutest, kus patsientide jaotus võrdlusrühmadesse ei olnud juhuslik või jaotusmeetod oli ebarahuldav (näiteks jaotati patsiendid uuringusse vastuvõtmise nädalapäevade järgi haigla) või puudub selle kohta üldse info. Veelgi vähem informatiivsed on ajaloolise kontrolliga uuringud (kui võrdluseks kasutatakse varem saadud andmeid või teistes raviasutustes tehtud uuringute tulemusi). Rahvusvahelises kirjanduses kirjeldatakse randomiseerimist 9/10 farmakoteraapiat käsitlevates artiklites, kuid ainult 1/3 artiklitest täpsustab randomiseerimise meetodit. Kui randomiseerimise kvaliteet on kahtluse all, ei ole katse- ja kontrollrühmad suure tõenäosusega võrreldavad ning tuleks otsida muid teabeallikaid.

Suur tähtsus on ravitulemuste kliinilisel ja statistilisel olulisusel. Kliinilise uuringu või populatsiooniuuringu tulemused esitatakse teabena tulemuste sageduse ja patsiendirühmadevaheliste erinevuste statistilise olulisuse kohta. Kas autor esitab statistiliselt olulisi, kuid väikseid erinevusi kliiniliselt olulistena? Statistiliselt oluline on see, mis tegelikult suure tõenäosusega eksisteerib. Kliiniliselt on oluline, et oma suuruse (näiteks suremuse vähenemise ulatuse) tõttu veenab arste vajaduses muuta oma praktikat uue ravimeetodi kasuks.

Ravimi efektiivsuse hindamise meetodid, kriteeriumid, vastavate näitajate mõõtmise aeg tuleks kokku leppida enne testi algust. Hindamiskriteeriumid on kliinilised, laboratoorsed, morfoloogilised ja instrumentaalsed. Sageli hinnatakse uuritava ravimi efektiivsust teiste ravimite annuse vähendamise järgi. Iga ravimirühma jaoks on kohustuslikud ja täiendavad (valikulised) kriteeriumid.

III faasi kliiniliste uuringute eesmärk on saada lisateavet farmakoloogilise toimeaine efektiivsuse ja kõrvaltoimete kohta, selgitada ravimi toime iseärasusi ja määrata suhteliselt harva esinevad kõrvaltoimed. Uuritakse ravimi omadusi vereringehäirete, neeru- ja maksafunktsiooniga patsientidel, hinnatakse koostoimeid teiste ravimitega. Ravi tulemused registreeritakse individuaalsetele registreerimiskaartidele. Uuringu lõpus võetakse tulemused kokku, töödeldakse neid statistiliselt ja esitatakse aruande vormis. Põhi- ja kontrollrühmas sama aja jooksul saadud vastavaid näitajaid võrreldakse staatiliselt. Iga näitaja puhul arvutatakse keskmine erinevus uuritud ajaperioodi kohta (võrreldes algtasemega enne ravi) ja hinnatakse iga rühma piires märgatava dünaamika usaldusväärsust. Seejärel võrreldakse kontroll- ja katserühmade spetsiifiliste näitajate väärtuste keskmisi erinevusi, et hinnata uuringuaine ja platseebo või võrdlusravimi toime erinevust. Uue ravimi kliiniliste uuringute tulemuste aruanne koostatakse vastavalt farmakoloogiakomitee nõuetele ja esitatakse komisjonile koos konkreetsete soovitustega. Soovitus kliiniliseks kasutamiseks loetakse põhjendatuks, kui uus toode:

Tõhusam kui tuntud sarnase toimega ravimid;

Sellel on parem taluvus kui tuntud ravimitel (sama tolerantsiga);

Efektiivne juhtudel, kui ravi teadaolevate ravimitega on ebaõnnestunud;

Kuluefektiivsem, sellel on lihtne ravimeetod või mugavam ravimvorm;

Kombineeritud ravi korral suurendab see olemasolevate ravimite efektiivsust, suurendamata nende toksilisust.

Pärast uue ravimi veterinaarpraktikas kasutamise heakskiitmist ja kasutuselevõttu algavad IV faasi uuringud - praktikas uuritakse ravimi toimet erinevates olukordades.

Ravimainete uurimise meetodid jagunevad järgmisteks osadeks:

1. füüsiline,

2. keemiline,

3. füüsikalised ja keemilised

4. bioloogiline.

Füüsikalised analüüsimeetodid hõlmab aine füüsikaliste omaduste uurimist ilma keemilisi reaktsioone kasutamata. Nende hulka kuuluvad: lahustuvuse, läbipaistvuse või hägususastme, värvuse määramine; tiheduse (vedelate ainete puhul), niiskuse, sulamistemperatuuri, tahkumistemperatuuri, keemistemperatuuri määramine.

Keemilised uurimismeetodid põhineb keemilistel reaktsioonidel. Nende hulka kuuluvad: tuhasisalduse määramine, keskkonna reaktsioon (pH), õlide ja rasvade iseloomulikud numbrilised näitajad (happearv, joodiarv, seebistumisarv jne). Raviainete identifitseerimisel kasutatakse ainult selliseid reaktsioone, millega kaasneb visuaalne välismõju, näiteks lahuse värvuse muutumine, gaaside eraldumine, sademete sadestumine või lahustumine jne. Keemilised uurimismeetodid ka hõlmavad analüütilises keemias kasutatavaid kvantitatiivse analüüsi massi ja mahu meetodeid (neutraliseerimismeetod, sadestamine, redoksmeetodid jne). Viimastel aastatel on farmaatsiaanalüüs hõlmanud selliseid keemilisi uurimismeetodeid nagu tiitrimine mittevesikeskkonnas, kompleksomeetria. Orgaaniliste ravimainete kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs viiakse reeglina läbi nende molekulide funktsionaalrühmade olemuse järgi.

Via füüsikalised ja keemilised meetodid uurida füüsikalisi nähtusi, mis tekivad keemiliste reaktsioonide tulemusena. Näiteks kolorimeetrilisel meetodil mõõdetakse värvi intensiivsust olenevalt aine kontsentratsioonist, konduktomeetrilises analüüsis, lahuste elektrijuhtivuse mõõtmises jne.

Füüsikaliste ja keemiliste meetodite hulka kuuluvad: optilised (refraktomeetria, polarimeetria, emissiooni- ja fluorestsentsanalüüsi meetodid, fotomeetria, sh fotokolorimeetria ja spektrofotomeetria, nefelomeetria, turbodimeetria), elektrokeemilised (potentsiomeetrilised ja polarograafilised meetodid), kromatograafilised meetodid.

bioloogiline see on loomkatse (konnad, tuvid, kassid). Määratletud ühikutes. Kohaldatakse: südameglükosiide sisaldav MPS, hormoone sisaldavad ravimid, ensüümid, vitamiinid, antibiootikumid.

Ekstemporaalsete ravimite, VAZ, VAF registreerimine toimub vastavalt Vene Föderatsiooni tervishoiuministeeriumi korraldusele nr 376 ja ühe disaini juhistele.

Individuaalselt ja apteegisisese valmistamise ja pakendamise järjekorras valmistatud ravimite kujunduse märgised, olenevalt nende kasutusviisist, jagunevad järgmisteks osadeks:

ü sisekasutuseks mõeldud ravimite etiketid kirjaga "Sisemine", "Sisemine lastele";

ü välispidiseks kasutamiseks mõeldud ravimite etiketid kirjaga "Väline";

ü parenteraalseks manustamiseks mõeldud ravimite etiketid, millel on kiri "Süstimiseks";

ü Silmaravimite sildid kirjaga "Silmatilgad", "Silmasalv".

Kõigile individuaalselt ja apteegis valmistamise ja pakendamise järjekorras koostatud ravimite kujunduse etikettidel peavad olema tüpograafiliselt trükitud igale ravimvormile vastavad hoiatussildid:

ü jookide puhul - "hoida jahedas ja pimedas", "enne kasutamist loksutada";

ü salvidele, silmasalvidele ja silmatilkadele - "hoida jahedas ja pimedas";

ü sisekasutuseks mõeldud tilkadele - "hoida valguse eest kaitstud kohas";

ü süstimiseks - "steriilne".

Kõik etiketid peavad sisaldama hoiatust "Hoida lastele kättesaamatus kohas".

Annustamisvorm on näidatud käsitsi.

Kõik apteegisisese hankimise ja pakendamise järjekorras koostatud ravimite kujunduse etiketid peavad kandma järgmisi tähistusi:

ü embleem (kauss maoga);

ü apteegiasutuse (ettevõtte) asukoht;

ü apteegiasutuse (ettevõtte) nimi;

ü kasutusviis (sisemine, välimine, süstimiseks) või ravimvorm (salv, silmatilgad, ninatilgad jne);

valmistamise kuupäev...;

ü hea ...;

ü seeria...;

ü Hoida lastest eemal.

Individuaalselt valmistatud ravimite kujunduseks mõeldud apteegi etikettide tekst ja pealekandmisviis peavad olema trükitud vene või kohalikus keeles.

Apteegis valmistamise ja pakendamise järjekorras koostatud ravimite kujunduseks mõeldud apteegi siltide tekst, nende nimetused ja vajalikud hoiatussildid on soovitatav trükkida tüpograafiliselt.

Ravimitele kleebitud hoiatussiltidel on järgmised teksti- ja signaalvärvid:

ü "raputage enne kasutamist" - roheline font valgel taustal;

ü "hoia valguse eest kaitstud kohas" - valge font sinisel taustal;

ü "hoida jahedas kohas" - valge font sinisel taustal;

ü "lapselik" - valge font rohelisel taustal;

ü "vastsündinutele" - valge font rohelisel taustal;

ü "käsitsege ettevaatlikult" - punane font valgel taustal;

ü "süda" - valge font oranžil taustal;

ü "Keep away from fire" - valge font punasel taustal.

Eriti mürgised ained (<...>, tsüaniid ja elavhõbe oksütsüaniid) on varustatud ühe musta hoiatussildiga, millel on vene (või kohalikus) keeles valges kirjas mürkaine nimetus, millel on ristluude ja kolju kujutis ning kiri "mürk" ja "käsitsege ettevaatlikult" kehtiva korra kohaselt.

Erinevates omandivormides apteekides (ettevõtetes) valmistatud ravimite registreerimine vastavalt esitatud ravimite registreerimise ühtsele eeskirjale aitab kaasa elanikkonna ravimiga varustatuse kultuuri parandamisele, tugevdab kontrolli valmistatud ravimite aegumistähtaegade üle ning nende hinda, juhtides neile tähelepanu, et välistada võimalikud vead nende kasutamisel.

Tariifide määramine

Makse sisaldab:

1. Ravimite maksumus

2. Abimaterjalide maksumus

3. Nõude maksumus

4. Kulud

Tariifid kinnitatakse apteegi tellimusel.

Tootmiskulude määramise lähteandmeteks on apteegi viimase kuu raamatupidamis- ja aruandlusandmed.

Tingimuslike tootmisüksuste arv kajastab ühe ravimiühiku ja meditsiiniseadmete valmistamise tööjõumahukust.

Ühe tootmisüksuse kohta võetakse tinglikult vastu 10 minuti jooksul tehtud tööd.

Steriilsete ja vedelate ravimvormide, salvide ühe tootmisühiku jaoks aktsepteeritakse ravimpreparaati, mis on täielikult valmistatud vastavalt kehtivatele dokumentidele ja mõeldud väljastamiseks.

Steriilsed ravimvormid hõlmavad süstelahuseid, infusioonilahuseid, oftalmoloogilisi niisutuslahuseid, vastsündinute lahuseid ja õlisid.

ZhLF-i hulka kuuluvad sise- ja välispidiseks kasutamiseks mõeldud lahused ja tilgad, õlid, puhastatud vesi.

Salvide hulka kuuluvad pastad, linimendid, vedelad plaastrid, suspensioonid, emulsioonid.

Ühe ühiku pulbrite ja suposiitide jaoks on tavapäraselt aktsepteeritud 10 annusega pakendiga ravimvorm.

Sarnane teave.

Farmatseutiline analüüs (FA). See on farmatseutilise keemia aluseks ja sellel on oma omadused, mis eristavad seda teist tüüpi analüüsidest. Need seisnevad selles, et analüüsitakse erineva keemilise olemusega aineid: anorgaanilisi, organoelemente, radioaktiivseid, orgaanilisi ühendeid lihtsatest alifaatsetest kuni keerukate looduslike bioloogiliselt aktiivsete aineteni. Analüütide kontsentratsioonide vahemik on äärmiselt lai. Farmatseutilise analüüsi objektid ei ole ainult üksikud ravimained, vaid ka erinevat arvu komponente sisaldavad segud.

Narkootikumide arsenali iga-aastane täiendamine nõuab nende analüüsimiseks uute meetodite väljatöötamist. Farmatseutilise analüüsi meetodeid on vaja süstemaatiliselt täiustada seoses nõuete pideva tõusuga nii ravimite kvaliteedile kui ka nendes sisalduvate bioloogiliselt aktiivsete ainete kvantitatiivsele sisaldusele. Seetõttu esitatakse farmaatsiaanalüüsile kõrgeid nõudmisi. See peaks olema piisavalt spetsiifiline ja tundlik, riigi farmakopöa X ja XI ning muude teaduslike ja tehniliste dokumentide (FS, GOST) regulatiivsete nõuete suhtes täpne, teostatud lühikese aja jooksul, kasutades minimaalset kogust katsepreparaate ja reaktiive. .

Sõltuvalt püstitatud ülesannetest hõlmab farmatseutiline analüüs erinevaid ravimite kvaliteedikontrolli vorme: farmakopöa analüüs; ravimite tootmise astmeline kontroll; individuaaltoodangu ravimvormide analüüs; kiiranalüüs apteegis ja biofarmatseutiline analüüs. Selle lahutamatu osa on farmakopöaanalüüs, mis on riiklikus farmakopöas või muus NTD-s (FS, FSP, GOST) sätestatud ravimite ja ravimvormide uurimise meetodite kogum. Farmakopöa analüüsi käigus saadud tulemuste põhjal tehakse järeldus ravimi vastavuse kohta riikliku farmakopöa või muu teadusliku ja tehnilise dokumentatsiooni nõuetele. Nendest nõuetest kõrvalekaldumise korral ei ole ravimit lubatud kasutada.

Taimse tooraine keemiline analüüs. Vastavalt teostustehnikale ja saadud tulemuste olemusele jagunevad keemilised reaktsioonid mitmeks rühmaks: kvalitatiivne, mikrokeemiline ja histokeemiline, mikrosublimatsioon.

Taimsete ravimmaterjalide ehtsuse kindlakstegemiseks kasutatakse kõige lihtsamaid kvalitatiivseid reaktsioone ja kromatograafilisi teste toimeainete ja sarnaste ainete jaoks. Metoodikat on kirjeldatud uuritud tooraineliigi vastavas regulatiivses dokumentatsioonis jaotises "Kvalitatiivsed reaktsioonid".

Kvalitatiivsed reaktsioonid viiakse läbi kuivale toorainele järgmiste toorainetüüpidega: tamme koor, viburnum, astelpaju, bergeenia risoomid, elecampane risoomid ja juured, võilillejuured, vahukomm, ženšenn, lodjapuu, pärnaõied, linaseemned, tungaltera sklerootia kokku 12 liiki toorainet).

Põhimõtteliselt viiakse kvalitatiivsed reaktsioonid läbi ravimtaimedest ekstraheerimisega (ekstraheerimisega).

Lähtuvalt bioloogiliselt aktiivsete ainete omadustest ekstraheeritakse need toorainest vee, erineva kontsentratsiooniga alkoholi või orgaanilise lahustiga, harvem leelise või happe lisamisega.

Vesiekstrakt valmistatakse toorainest, mis sisaldab glükosiide, polüsahhariide, saponiine, fenoolglükosiide, antraglükosiide ja tanniine. Alkaloidide eraldamiseks soolade kujul kasutatakse toorainest hapendatud vett.

Suur hulk bioloogiliselt aktiivseid aineid (südameglükosiidid, kumariinid, lignaanid, flavonoidid) ekstraheeritakse erineva kontsentratsiooniga etüül- ja metüülalkoholiga.

Kui reaktsioon on piisavalt spetsiifiline ja tundlik, viiakse see läbi toorekstraktiga toorainest.

Need reaktsioonid hõlmavad järgmist:

üldised alkaloidide settereaktsioonid;

reaktsioonid alumiiniumkloriidi lahusega flavonoididele (naistepuna, kõrgendiku lind, mägine pipar jne);

Sinodi test flavonoidide tuvastamiseks immortelle lilledes;

reaktsioon leeliselahusega antratseeni derivaatide jaoks (astelpajukoor, rabarberi juured jne);

reaktsioon raud-ammooniummaarja lahusega parkaineteks (tammekoor, serpentiinsed risoomid, bergeenia jne).

Kaasnevad ained (valgud, amiinid, steroolid, klorofüll) segavad sageli reaktsiooni. Sel juhul kasutatakse puhastatud ekstrakti (näiteks südameglükosiide, kumariine, alkaloide, fenoolglükosiide, lignaane sisaldavatest toorainetest).

Ekstrakt puhastatakse, sadestades kaasasolevad ained pliatsetaadi ja naatriumsulfaadi lahusega või kasutades lahustivahetustehnikat või jaotuskromatograafiat.

Mikrokeemilised reaktsioonid viiakse tavaliselt läbi samaaegselt mikroskoopilise analüüsiga, jälgides tulemusi mikroskoobi all:

eeterlikel ja rasvõlidel Sudan III lahusega;

lignified lignified elementidel floroglütsinooli lahusega ja 25% väävelhappe või kontsentreeritud vesinikkloriidhappe lahusega.

Tammekoor (pulber) lastakse reageerida raudammooniummaarjaga ja reaktsiooni tulemust uuritakse mikroskoobi all.

Histokeemilised reaktsioonid on sellised reaktsioonid, mille abil on võimalik identifitseerida teatud ühendeid otse rakkudes või struktuurides, kus need paiknevad.

Riikliku farmakopöa XI kohaselt viiakse histokeemilised reaktsioonid lima läbi vahukommi juurtes ja linaseemnetes oleva rümba lahusega.

mikrosublimatsioon- kuumutamisel kergesti sublimeeruvate ainete otsene eraldamine kuivast taimsest materjalist. Saadud sublimaati uuritakse mikroskoobi all, seejärel viiakse läbi mikrokeemiline reaktsioon sobiva reagendiga.

Taimsete ravimmaterjalide ehtsuse määramise meetodid. Toorainete ehtsus määratakse makroskoopilise, mikroskoopilise, keemilise ja luminestsentsanalüüsiga.

makroskoopiline analüüs. Selle läbiviimiseks peate teadma taimede morfoloogiat. Uuritakse palja silmaga või luubiga toorainete välimust, mõõdetakse millimeetrilise joonlauaga osakeste suurust. Päevavalguses määratakse tooraine värvus pinnalt, murru ja lõikekoha järgi. Lõhn tuvastatakse taimede hõõrumisel või purustamisel ja maitse - ainult mittemürgistes taimedes. Välimuse uurimisel pöörake tähelepanu tooraine osade morfoloogilistele iseärasustele.

Mikroskoopiline analüüs. Kasutatakse purustatud ravimtaimmaterjalide ehtsuse määramiseks. Selleks on vaja teada taimede anatoomilist ehitust tervikuna ja konkreetsele taimele iseloomulikke omadusi, mis teda teistest taimedest eristavad.

Keemiline analüüs. See näeb ette kvalitatiivsed, mikrokeemilised, histokeemilised reaktsioonid ja sublimatsiooni toimeainete või nendega seotud ainete määramiseks tooraines. Mikrokeemilisi reaktsioone on soovitatav läbi viia paralleelselt mikroskoopilise analüüsiga. Histokeemilised reaktsioonid viiakse läbi spetsiifiliste ühendite tuvastamiseks nende lokaliseerimise kohtades taimes. Sublimatsiooni all mõistetakse taimsetest materjalidest kuumutamisel kergesti sublimeeritavate ainete tootmist, millele järgneb kvalitatiivne reaktsioon sublimaadiga.

Luminestsentsanalüüs. See on meetod erinevate objektide (ka bioloogiliste) uurimiseks, mis põhineb nende luminestsentsi vaatlusel. Luminestsents - gaasi, vedela või tahke aine kuma, mis ei tulene mitte keha kuumenemisest, vaid selle aatomite ja molekulide mittetermilisest ergastusest. Luminestsentsanalüüsi tehakse luminestsentsainete määramiseks ravimite tooraines.

Organoterapeutiliste preparaatide kvaliteedikontroll. Näärmete kvaliteedi vastavuse kontrollimiseks standardi nõuetele valitakse igast partiist välja 5% kaste või pakendeid, kuid mitte vähem kui viis sellist pakki. Kui mõnes avatud kastis või pakendis ei vasta näärmed vähemalt ühes indikaatoris vastava standardi nõuetele, siis kontrollitakse kogu partii.

Üksikute toorainetüüpide jaoks on selle kvaliteedi hindamiseks olemas objektiivsed (laboratoorsed) meetodid.

Objektiivselt määratakse insuliini tootmiseks mõeldud kõhunäärme kvaliteet vastavalt GOST-ile rasva massiosa ja insuliini massiosa järgi, kasutades sobivaid laboratoorseid meetodeid.

Rasva massiosa määratakse butüromeetriga. Insuliini massiosa kontrollitakse tarbija soovil immunoreaktiivse meetodiga, kasutades antiseerumit, immunoglobuliine homogeniseeritud näärmes.

Veiste keele limaskesta (epiteeli) kvaliteeti kontrollitakse epiteeliga säilitussöötme pH väärtuse ja selle bakteriaalse saastatuse määramise teel. Meetodi olemus seisneb mikroobide koguarvu määramises 1 ml epiteeliga säilituskeskkonnas.

Külmutatud veiste, sigade, lammaste ja kitsede silmade klaaskeha kvaliteedi määrab hüaluroonhappe (glükoosamiini) kvantitatiivne sisaldus klaaskehas. Meetodi põhimõte põhineb glükoosamiini määramisel hüaluroonhappe hüdrolüüsi saadustes, mis on hüaluroonhappe molekuli lahutamatu osa ja sõltub otseselt selle sisaldusest klaaskehas.

Hüpofüüsi bioloogiline aktiivsus määratakse ACTH toimeühikutes, mis sisalduvad 1 mg hüpofüüsist saadud happega atsetoonitud pulbris (CAP).

ACTH aktiivsuse määramine põhineb selle võimel põhjustada lümfoidkoe, eriti rotipoegade struuma vähenemist. Ravimi toimeühikuks võetakse ravimi ööpäevane annus, mis viiepäevasel manustamisel põhjustab näärme massi vähenemise 50 ± 5%.

Kõrvalkilpnäärmete kvaliteet määratakse histoloogilise meetodiga. Kõrvalkilpnäärme osadel on nähtavad tugeva basofiilse granulaarsusega epiteelirakkude akumulatsioonid. Lümfisõlmede osadel on nähtav retikulaarne kude (homogeense massi kujul), mida ümbritseb tihe sidekest (kapsel), millest sissepoole ulatuvad selgelt nähtavad ühendusnöörid. Osariigi standard näeb ette, et 40 näärmest koosnev proov ei tohi sisaldada rohkem kui ühte lümfisõlme.

Kuivbioloogiliste preparaatide kvaliteedi määramise meetodid. Kuivatel bioloogilistel preparaatidel on traditsiooniliste vedelate bioloogiliste preparaatide ees mitmeid eeliseid, mis on tingitud paremast kvaliteedist, väiksemast kaalust, pikema säilivusaja ja transpordi lihtsusest.

Füüsikalised meetodid. 1. Vaakumi määramise meetod. Meetodi olemus seisneb kõrgepinge kõrgsagedusliku elektrivoolu võimes tekitada gaasides hõõgumist, mille olemus muutub olenevalt ampullis (viaalis) oleva õhu hõrenemise astmest.

Näidisvalik. Proovide võtmine toimub kuivade bioloogiliste preparaatide riiklikes standardites kehtestatud reeglite kohaselt.

Seadmed ja seadmed. Testi läbiviimisel kasutavad nad: "D'Arsenali" või "Tesla" tüüpi aparaati, ampullide alust, metalllauda.

Testi läbiviimine. Testi ettevalmistamine:

enne testimist kontrollige välimust, viaalide korgistamise tihedust, pragude olemasolu, ampullide tihedust.

Seadet hoitakse pärast sisselülitamist 10 minutit. Katseampullid asetatakse statiivile, seejärel tuuakse neile 1 cm kaugusele elektrood Vaakumi määramisel Tesla aparaadiga maandatakse aparaadi üks metallelektrood läbi metalllaua, millele asetatakse ampullid. välja ja teine ​​viiakse testitud ampullidesse. Kokkupuude mitte rohkem kui 1 s.

Tulemuste töötlemine. Ampullide sees olev sära koos iseloomuliku särisemisega viitab vaakumi olemasolule.

Õhu vähenemise määr testitud ampullides määratakse gaaside hõõgumise olemuse järgi testitud ampullides vastavalt järgmistele andmetele.

Õhu vähenemise astme määramine testitud ampullides

2. Niiskuse määramise meetod. Meetodi olemus on määrata ravimiproovi massi vähenemine pärast 1-tunnist kuivatamist temperatuuril 105 °C.

Näidisvalik. Testimiseks valitakse erinevatest pakkimiskohtadest vajalik arv ampulle (viaale), võttes arvesse proovide massile esitatavaid nõudeid (vastavalt standardile).

Proovide võtmisel kontrollige ampullide tihedust. Lüofiliseeritud preparaadiga viaalides kontrollitakse seina ja põhja terviklikkust, samuti valtsitud korgi ja kummikorgi sobivust. Defektide olemasolul asendatakse viaal teisega. Iga vaakumi all suletud ampulli kontrollitakse enne ravimi väljavõtmist lekete suhtes.

Seadmed, materjalid ja reaktiivid. Katse ajal kasutatakse: laborikaalusid, laboratoorset kuivatuskappi, elavhõbedatermomeetreid, eksikaatorit, klaaspudeleid, tehnilist vaseliini, veevaba kaltsiumkloriidi või veetustatud kipsi või kaltsineeritud silikageeli.

Testiks valmistumine. Kuivatuskappi kontrollitakse maksimaalsete termomeetritega ühtlaseks kuumutamiseks.

Proovide kuivatamisel kaalupudelites peaks kontrolltermomeetri alumine osa olema kaalupudelite tasemel. Temperatuuri seadistamisel kapis on määravad kontrolltermomeetri näidud.

Kaal tuleb asetada stabiilsele vibratsioonivabale lauale. Kõikide kaalumiste tulemused registreeritakse grammides neljanda kümnendkoha täpsusega.

Eksikaatori põhi tuleb täita dehüdreeritud kaltsiumkloriidi või kipsi või silikageeliga. Anuma poleeritud servad määritakse kergelt tehnilise vaseliiniga.

Iga analüüsi jaoks tuleks ette valmistada kolm sama läbimõõdu ja kõrgusega pudelit.

Testi läbiviimine. Niiskusesisalduse määramiseks kasutatakse kolme ampulli, kui igas neist on proovi mass vähemalt 0,1 g Kui ampull sisaldab alla 0,1 g bioloogilist preparaati, siis võib kasutada kahte või enamat ampulli.

Valitud proov, mis on purustatud pulbriliseks, asetatakse ühtlase kihina eelnevalt kaalutud pudelisse.

Pudelid paigaldatakse riiulil olevasse kuivatuskappi. Kuivatamise alguseks tuleks lugeda aega, mil temperatuur saavutatakse kontrolltermomeetri järgi 105 °C. Kuivamisaeg 60 min.

Pärast kuivatamist suletakse kaalupudelid kiiresti kaanega ja viiakse toatemperatuurini jahutamiseks eksikaatorisse, misjärel kaalutakse kaalupudelid neljanda kümnendkoha täpsusega ja registreeritakse vastavalt vormile.

3. Hapniku koguse määramise meetod. Näidisvalik. Proovide võtmine toimub kuivade bioloogiliste preparaatide riiklikes standardites kehtestatud reeglite kohaselt.

Seadmed, materjalid ja reaktiivid. Katse ajal kasutatakse: LXM-8MD või muude sarnaste kaubamärkide gaasikromatograafi soojusjuhtivuse detektoriga ja gaasikromatograafilist kolonni läbimõõduga 3 mm ja pikkusega 1000 mm, muhvelahju kuumutamistemperatuur kuni 1000 ° C, büretiga gaasivoolumõõtur, stopper, meditsiiniline süstal mahuga 1 cm 3, kootud traatvõrgud, mõõtesuurendusklaas, eksikaator, portselanmört, metallist joonlaud 30 cm pikkused molekulaarsõelad - sünteetiline tseoliit klassi CaA, meditsiiniline nõel, meditsiiniline kummist toru siseläbimõõduga 4,2 mm, pikkus 10 m, pudel mahutavusega 3000 cm 3, kummikork, silikoonõli, heelium, lämmastik gaas, destilleeritud vesi.

Testiks valmistumine. Kolonni ettevalmistamine. Sünteetiline tseoliit purustatakse portselanmördis, sõelutakse sõelale, pestakse destilleeritud veega, kuivatatakse ja kaltsineeritakse muhvelahjus temperatuuril 450...500 °C 2 tundi, seejärel jahutatakse restidel eksikaatoris ruumi. temperatuuri.

Kromatograafiakolonn paigaldatakse vertikaalselt ja kaetakse sünteetilise tseoliidiga. Kolonni ei täideta 1 cm võrra ja see on ummistunud võrguga. Täidetud kolonn paigaldatakse kromatograafi termostaadi ja ilma detektoriga ühendamata juhitakse sellest 3 tunni jooksul läbi heeliumi või lämmastiku vool temperatuuril 160...180 °C. Seejärel kinnitatakse kolonn detektori külge ja heelium või lämmastik jätkab selle läbimist, kuni nulljoone triiv peatub detektori maksimaalse tundlikkuse juures.

Kromatograaf valmistatakse tööks ette ja lülitatakse sisse vastavalt tootja juhistele.

Viaali ettevalmistamine ravimiga testimiseks. Ravimi viaalist proovi võtmiseks võrdsustage gaasirõhk viaalis atmosfäärirõhuga.

Meditsiinilise süstla ettevalmistamine. Süstla vardale paigaldatakse eelnevalt metalltoru ja süstalt kontrollitakse lekete suhtes. Kontrollitud ja gaasiproovi võtmiseks ettevalmistatud nõelaga meditsiinilise süstlaga läbistatakse kummist toru, mille kaudu heelium väljub kromatograafi võrdluskolonnist, ning heelium tõmmatakse aeglaselt sisse ja vabastatakse süstlaga kaks korda. Kolmandal korral, tõmmates süstlasse heeliumi ja asetades selle nõelaga allapoole, võetakse ravimiga viaalist gaasiproovid.

Testi läbiviimine. Igast viaalist võetakse kaks gaasiproovi ja süstitakse üksteise järel 3...4 min intervalliga kromatograafi aurustisse. Proov sisestatakse aurustisse, vajutades sõrme õrnalt vardale. 110...120 s pärast proovi lisamist kromatogrammile joonistab salvesti hapnikupiigi ja seejärel lämmastiku piigi.

Tulemuste töötlemine. Arvutage hapniku ja lämmastiku piikide pindala. Selleks mõõdetakse kromatograafil 30 cm pikkuse metalljoonlaua, suurendusluubi ja teravalt teritatud pliiatsi abil hapniku ja lämmastiku piikide kõrgus ja laius. Piikide kõrgust mõõdetakse baasjoonest tipuni, tipu laiust mõõdetakse poolel kõrgusel. Mõõtmisel võtke kaugus piigijoone sisemisest paksusest välimise jooneni.

Hapniku (SO 2, mm 2) ja lämmastiku (5N 2, mm 2) piigi pindala arvutatakse valemitega

SO 2 \u003d h 1 * b 1; SN \u003d h 2 *b 2,

kus h 1 h 2 ~ hapniku- ja lämmastikupiikide kõrgus, mm; b 1 , b 2 - hapniku ja lämmastiku piikide laius, mm.

Hapniku mahuosa (X, %) igas gaasiproovis arvutatakse valemiga

X = SO 2 / (SO 2 + SN 2)

kus SO 2 , SN 2 on hapniku ja lämmastiku piikide pindalad, mm 2 .

Lõpliku testitulemuse saamiseks võetakse kolmes ravimiviaalis tehtud määramistulemuste aritmeetiline keskmine.

Meetodi suhteline vähendatud viga usaldustasemel P-0,95 ei tohiks ületada 10%.

bakterioloogiline meetod. Steriilsuse kontroll. Meetodi olemus seisneb mikrobioloogilises hinnangus bakterite ja seente kasvu puudumise kohta preparaatide inokuleerimisel toitesöötmele.

Näidisvalik. Igast preparaatide seeriast võetakse proove 0,15% viaalides, kuid vedelate preparaatide puhul mitte vähem kui viis ja kuivpreparaatide puhul 10 ampulli.

Testiks valmistumine. Laboratoorseid klaasnõusid keedetakse 15 minutit destilleeritud vees, hapestatakse vesinikkloriidhappe lahusega, seejärel pestakse kraaniveega ja pestakse pintsliga lahuses, mis sisaldab 30 g pesupulbrit ja 50 cm 3 ammoniaagi vesilahust 1000 cm 3 kohta. destilleeritud veest. Pärast seda pestakse nõusid põhjalikult esmalt kraaniveega ja seejärel kolm korda destilleeritud veega, kuivatatakse ja steriliseeritakse.

Enne steriliseerimist asetatakse nõud metallkarpidesse. Nõusid steriliseeritakse autoklaavis 0,15 MPa juures 60 minutit.

Valmis toitekeskkond, mida on testitud kasvuomaduste suhtes, valatakse 6...8 cm 3 (anaeroobide määramiseks 10...12 cm 3) katseklaasidesse, 50...60 cm 3 100 cm 3 viaalidesse.

Kuivade bioloogiliste preparaatide proovid lahustatakse eelnevalt steriilse lahustiga (isotooniline naatriumkloriidi lahus, destilleeritud vesi jne).

Testi läbiviimine. 1. Steriilsuse testimine tioglükooli söötmega.

Igast ravimi viaalist inokuleeritakse 1 cm3 kolme katseklaasi, mis sisaldavad tioglükooli söödet.

Kahte inokuleeritud katseklaasi hoitakse termostaadis 14 päeva: ühte temperatuuril 21 °C, teist temperatuuril 37 °C.

Kolmandat katseklaasi hoitakse 7 päeva temperatuuril 37 °C ja seejärel valmistatakse sellest 0,5 cm 3 suurused subkultuurid, üks katseklaas kaldkaseiinagari, kaseiintoitepuljongi, Sabouraud söötme ja 1 cm 3 kaseiinitoiteaine jaoks. puljong vaseliiniõli all koos liha- või maksatükkidega.

Kaseiinagarile, liha-peptoonpuljongile ülekandmist hoitakse veel 7 päeva temperatuuril 37 °C ja ülekandmist Sabouraud söötmele - temperatuuril 21 °C.

Preparaatide proovide testimisel jälgitakse söötme steriilsust: kolme katseklaasi iga söötmega hoitakse termostaadis 14 päeva temperatuuril 37 °C, Sabouraud söötmega - temperatuuril 21 °C.

2. Steriilsuse testimine ilma tioglükoolsöötmeta.

Igast preparaadi proovist inokuleeritakse Sabouraud' vedelat söödet, liha-peptoonagarit ja liha-peptoonpuljongit – igaüks kolm katseklaasi; Tarozzi söötmel - kaks katseklaasi ja kaks viaali.

Aeroobide tuvastamiseks külvatakse ühte katseklaasi 0,5 cm 3 ja ühte viaali 1 ... 2 cm 3 ning anaeroobide tuvastamiseks vastavalt 1 ja 5 cm 3. Põllukultuurid asetatakse 7 päevaks (anaeroobide puhul 15 päeva) termostaadi (temperatuuril 37 ° C; Sabouraud - temperatuuril 21 ° C). Seejärel tehakse uuesti külv (v.a. liha-peptoonagarile külvamine). Subkultuuritud samal meedial. Talub 7 päeva (anaeroobide puhul 15 päeva). Steriilsuse kontroll viiakse läbi.

Tulemuste hindamine. Esmase ja korduva inokulatsiooni tulemusi võetakse arvesse makroskoopilisel ja mikroorganismide kasvu korral - kõigi põllukultuuride mikroskoopilisel uurimisel, võetakse arvesse 14 päeva pärast esmast nakatamist tioglükoolsöötmel ja 7 päeva pärast esialgset inokuleerimist. inokuleerimine ilma tioglükooli söötmeta. Söödet loetakse steriilseks, kui üheski inokuleeritud katseklaasis ei täheldata kasvu.

Kasvu korral vähemalt ühes nakatatud katseklaasis korratakse steriilsuse kontrolli sama arvu proovide puhul ja tehakse kasvanud mikroobide mikroskoopia. Määrdud on Gramiga värvitud, võttes arvesse morfoloogiat.

Kasvu puudumisel korduvas kontrollis loetakse ravim steriilseks. Kasvu olemasolul vähemalt ühes katseklaasis ja mikrofloora identsus esmase ja korduva põllukultuuri ajal, loetakse ravim mittesteriilseks.

Kui esmasel ja korduval inokulatsioonil tuvastatakse erinev mikrofloora ning kasvu tuvastatakse ainult üksikutes katseklaasides, inokuleeritakse proove kolmandat korda.

Kasvu puudumisel peetakse ravimit steriilseks. Kui kasv tuvastatakse vähemalt ühes katseklaasis, olenemata mikrofloora iseloomust, loetakse ravim mittesteriilseks.

Regulatiivsed nõuded valmis ravimvormide kvaliteedile. Annustamisvorme valmistatakse tehastes, farmaatsiatehastes (ametlikud ravimid) ja apteekides (pagasiravimid). Valmis ravimvormide kontroll farmaatsiaettevõtetes toimub vastavalt NTD (osariigi farmakopöa, FS, FSP, GOST) nõuetele. Nende dokumentide nõuete kohaselt peavad ravimvormid olema kontrollitavad (V. D. Sokolov, 2003).

Tablette testitakse lagunemise suhtes. Kui eraartiklis ei ole teisiti märgitud, peaksid tabletid lagunema 15 minuti jooksul ja kaetud tabletid ei tohi ületada 30 minutit. Enterokatabletid ei tohiks laguneda 1 tunni jooksul vesinikkloriidhappe lahuses, kuid need peaksid lagunema 1 tunni jooksul naatriumvesinikkarbonaadi lahuses. Hõõrduvate tablettide tugevus peab olema vähemalt 75%. Tabletis sisalduv ravim tuleb 45 minuti jooksul vees lahustada vähemalt 75%. Keskmine kaal määratakse 20 tableti kaalumisel täpsusega 0,001 g Lubatud on kõrvalekalded keskmisest kaalust: ± 7,5% tablettide kaaluga 0,1 ... 0,3 g ja ± 5% tablettide puhul, mis kaaluvad 0,5 g ja rohkem. Tabletid kontrollivad ka talki sisaldust.

Graanulid – määrake suurus sõelaanalüüsi abil. Rakkude läbimõõt peaks olema 0,2...3 mm, väiksemate ja suuremate graanulite arv ei tohiks ületada 5%. 0,5 g graanulite lagunemiskatse on sama, mis tablettide puhul. Lagunemisaeg ei tohiks ületada 15 minutit. Määrake niiskus. Raviaine sisalduse määramiseks võetakse proov, mis koosneb vähemalt 10-st pungitud graanulitest.

Kapslid – kontrolli keskmist kaalu. Iga kapsli kõrvalekalle sellest ei tohiks ületada ± 10%. Nii nagu seda tehakse tablettidega, kontrollitakse lagunemist ja lahustuvust ning 0,05 g või vähem raviainet sisaldavate kapslite annuste ühtsus määratakse. Raviainete kvantitatiivne määramine toimub spetsiaalsete meetoditega, kasutades selleks 20 kuni 60 kapsli sisu.

Pulbrid - määrake doseeritud pulbrite massi kõrvalekalded. Neid võib olla ± 15% pulbri massiga kuni 0,1 g; ±10% - 0,1 kuni 0,3 g; ±5% - 0,3 kuni 1; ±3% - üle 1 g.

Suposiidid - visuaalselt määrake pikisuunalise lõike ühtlus. Keskmine kaal määratakse kaalumise teel 0,01 g täpsusega, kõrvalekalded ei tohiks ületada ± 5%. Lipofiilsetel alustel valmistatud ravimküünlaid reguleerib sulamistemperatuur. See ei tohi ületada

37 °C. Kui seda temperatuuri ei saa kindlaks teha, määratakse täieliku deformatsiooni aeg, mis ei tohiks olla pikem kui 15 minutit. Hüdrofiilsel alusel valmistatud suposiite testitakse lahustuvuse suhtes (indikaator "lahustumine"). Määrake lahustumisaeg temperatuuril (37 ± 1) ° C, mis ei tohiks ületada 1 tund Raviainete kvantitatiivne määramine toimub spetsiaalsete meetodite järgi.

Tinktuurid - määrake alkoholisisaldus või tihedus. Toimeainete sisaldus määratakse spetsiaalsete tehnikate abil. Lisaks määratakse kuivjääk pärast 5 ml tinktuuri aurutamist pudelis kuivaks ja kuivatamist 2 tundi temperatuuril (102,5 ± 2,5) °C. Samas koguses tinktuuris määratakse pärast selle segu põletamist ja kaltsineerimist 1 ml kontsentreeritud väävelhappega raskmetallide sisaldus.

Ekstraktid – nagu tinktuurides, määravad alkoholi, toimeainete, raskmetallide tiheduse või sisalduse. Samuti määratakse kindlaks jäägi kuivmass ning paksus ja kuivekstraktis - niiskusesisaldus [kuivatades ahjus temperatuuril (102,5 ± 2,5) ° C).

Aerosoolid – mõõdetakse rõhku ballooni sees manomeetri abil toatemperatuuril (kui raketikütus on surugaas). Kontrollige pakendit lekete suhtes. Doseeritud pakendites määratakse ravimi keskmine mass ühes annuses, mille kõrvalekalle on lubatud mitte rohkem kui +20%. Sisu väljundi protsendi määramiseks eemaldage see silindrist ja seejärel kaaluge. Aine kvantitatiivne määramine toimub vastavalt riikliku farmakopöa eraartiklite nõuetele. Kõrvalekalded märgitud kogustest ei tohi ületada ±15%.

Salvid – levinud test on salvides sisalduva ravimaine osakeste suuruse määramise meetod. Kasutatakse okulaarse mikromeetriga MOV-1 mikroskoopi.

Plaastrid. Koostis, kvaliteedinäitajad, katsemeetodid on erinevad ja on sätestatud konkreetsete toodete regulatiivses dokumentatsioonis.

Silmatilku testitakse steriilsuse ja mehaaniliste lisandite olemasolu suhtes.

Süstitavad ravimvormid. Erilist tähelepanu nõuavad intravenoosselt suurtes kogustes manustatavad süstitavad ravimilahused. Nad kasutavad selliseid omadusi nagu välimus, sealhulgas lahuste värvus ja läbipaistvus, mehaaniliste lisandite puudumine, apürogeensus, steriilsus, lahuse maht, selles sisalduva toimeaine kogus, vereplasma pH ja isotoonilisus, pakend, märgistus. , ja ampullide täitmise maht. Lubatud kõrvalekallete normid on märgitud riiklikus farmakopöas XI. Lisaks määratakse abiainete sisaldus; mõnele neist (fenool, kresool, sulfitid, klorobutanool) on ette nähtud lubatud kogused (0,2–0,5%). pH-nõuded varieeruvad sõltuvalt koostisest, tavaliselt vahemikus 3,0 kuni 8,0. Igal ampullil (pudelil) märkida ravimi nimetus, selle sisaldus (protsentides) või aktiivsus (toimeühikutes, ED), maht või mass, partii number, kõlblikkusaeg. Kõik süstitavate ravimvormide testid on reguleeritud NTD-ga.

Homöopaatiliste ravimite analüüs on raviainete suurte lahjenduste tõttu väga keeruline. Kui bioloogiliselt aktiivsed ained sisalduvad tinktuurides, essentsides, salvides ja muudes vormides lahjendustes kuni 2 C (C - centesimaal) või 0,0001, siis nende analüüs ja standardiseerimine ei erine praktiliselt allopaatilises meditsiinis kasutatavate ravimvormide kvaliteedikontrollist. Ravimeid lahjenduses 2 ... 3 C (10 -4 ... 10 -6) analüüsitakse pärast spetsiaalseid kontsentreerimise meetodeid, kasutades aurustamist, ainete põletamist, millele järgneb määramine ühe füüsikalis-keemilise meetodi abil, mis põhineb selle lahutusvõimel. . Lahjendusel üle 3 C (10–6) piisab ühekordses või päevases annuses sisalduva ravimi ehtsuse tuvastamisest. Väga suurte lahjenduste korral (kuni 50 C või 10 -10 ... 10 -100) on homöopaatiliste ravimite kvaliteeti olemasolevate meetoditega võimatu kontrollida. Selliste ravimite kvaliteedikontroll viiakse läbi tootmisetapis, kontrollides rangelt tehnoloogilist protsessi. Kvaliteeti kontrollitakse koostisosade lisamisel ja registreeritakse laadimisaktis. Iga koostisosa suhtes tehakse eelanalüüs. Kõigil neil juhtudel kasutatakse homöopaatiliste ravimite analüüsiks ja standardiseerimiseks kromatograafilisi, fotomeetrilisi, fluorestsents- ja muid meetodeid.

5 / 5 (hääled: 1 )

Tänapäeval on üsna tavaline leida ebakvaliteetseid ravimeid ja näivaid pille, mis panevad tarbijas kahtlema nende tõhususes. On olemas teatud ravimianalüüsi meetodid, mis võimaldavad maksimaalse täpsusega määrata ravimi koostist, selle omadusi ja see näitab ravimi mõju inimkehale. Kui teil on ravimi kohta teatud kaebusi, võib selle keemiline analüüs ja objektiivne arvamus olla tõendiks igas kohtumenetluses.

Milliseid ravimianalüüsi meetodeid kasutatakse laborites?

Ravimi kvalitatiivsete ja kvantitatiivsete omaduste kindlakstegemiseks spetsialiseeritud laborites kasutatakse laialdaselt järgmisi meetodeid:

• Füüsikalised ja füüsikalis-keemilised, mis aitavad määrata lisandite sulamis- ja tahkumistemperatuuri, tihedust, koostist ja puhtust, leida raskmetallide sisaldust.
• Keemiline, lenduvate ainete, vee, lämmastiku olemasolu, ravimaine lahustuvuse, selle happe, joodiarvu jms määramine.
• Bioloogiline, mis võimaldab teil testida aine steriilsust, mikroobset puhtust, toksiinide sisaldust.

Ravimite analüüsimeetodid võimaldavad kindlaks teha tootja deklareeritud koostise ehtsuse ja määrata väikseimad kõrvalekalded normidest ja tootmistehnoloogiast. ANO "Center for Chemical Expertise" laboris on olemas kõik vajalikud seadmed mis tahes tüüpi ravimite täpseks uurimiseks. Kõrgelt kvalifitseeritud spetsialistid kasutavad ravimite analüüsimiseks erinevaid meetodeid ja annavad objektiivse eksperthinnangu võimalikult lühikese aja jooksul.

Raviainete uuringu eesmärk on teha kindlaks ravimi sobivus meditsiiniliseks kasutamiseks, s.o. vastavus selle ravimi regulatiivsele dokumendile.

Farmatseutiline analüüs on teadus, mis käsitleb bioloogiliselt aktiivsete ainete keemilist iseloomustamist ja mõõtmist kõigis tootmisetappides: alates tooraine kontrollist kuni saadud ravimaine kvaliteedi hindamise, selle stabiilsuse uurimise, aegumiskuupäevade määramiseni ja valmis ravimvormi standardiseerimine. Farmatseutilise analüüsi eripäraks on selle mitmekülgsus ja ainete või nende segude mitmekesisus, sh üksikud kemikaalid, bioloogiliste ainete komplekssegud (valgud, süsivesikud, oligopeptiidid jne). Analüüsimeetodeid tuleb pidevalt täiendada ja kui UP farmakopöas domineerisid keemilised meetodid, sh kvalitatiivsed reaktsioonid, siis praeguses etapis kasutatakse peamiselt füüsikalis-keemilisi ja füüsikalisi analüüsimeetodeid.

Farmatseutiline analüüs hõlmab olenevalt ülesannetest ravimite kvaliteedikontrolli erinevaid aspekte:
1. Farmakopöa analüüs;
2. Ravimite tootmise astmeline kontroll;
3. Üksikute ravimite analüüs.

Peamine ja olulisem on farmakopöa analüüs, s.o. ravimite standardile vastavuse analüüs - farmakopöa monograafia või muu ND ja seega selle sobivuse kinnitus. Sellest tulenevad nõuded analüüsi kõrgele spetsiifilisusele, selektiivsusele, täpsusele ja usaldusväärsusele.

Järelduse ravimi kvaliteedi kohta saab teha ainult proovianalüüsi (statistiliselt olulise valimi) põhjal. Valimi võtmise kord on näidatud kas eraartiklis või Global Fundi X1 üldartiklis. (2. väljaanne) lk.15. Ravimite regulatiivse ja tehnilise dokumentatsiooni nõuetele vastavuse kontrollimiseks viiakse läbi mitmeastmeline proovide võtmine (proovide võtmine). Mitmeetapilise proovivõtmisega moodustatakse proov (proov) etapiviisiliselt ja iga etapi tooted valitakse juhuslikult proportsionaalses koguses eelmises etapis valitud ühikute hulgast. Etappide arv määratakse pakendi tüübi järgi.

1. etapp: pakendiühikute (kastid, karbid jne) valik;
2. etapp: pakendis olevate pakendiüksuste valik (karbid, pudelid, purgid jne);
3. etapp: toodete valik esmases pakendis (ampullid, viaalid, blistrid jne).

Igas etapis toodete arvu valiku arvutamiseks kasutage valemit:

kus n- selle etapi pakendiühikute arv.

Spetsiifilist proovivõtuprotseduuri kirjeldatakse üksikasjalikult GF X1 väljaandes, väljaandes 2. Sel juhul peetakse analüüsi usaldusväärseks, kui vähemalt neli proovi on reprodutseeritavad.

Farmatseutilise analüüsi kriteeriumid

Analüüsi erinevatel eesmärkidel on olulised sellised kriteeriumid nagu analüüsi selektiivsus, tundlikkus, täpsus, analüüsi aeg, uuritava aine kogus.

Analüüsi selektiivsus on mitmest aktiivsest komponendist koosnevate komplekspreparaatide analüüsimisel oluline. Sel juhul on analüüsi selektiivsus iga aine kvantitatiivseks määramiseks väga oluline.

Nõuded täpsusele ja tundlikkusele sõltuvad uuringu objektist ja eesmärgist. Puhtuse või lisandite testimisel kasutatakse ülitundlikke meetodeid. Tootmise astmelise kontrolli jaoks on oluline analüüsile kuluv ajategur.

Analüüsimeetodi oluline parameeter on meetodi tundlikkuse piir. See piirmäär tähendab madalaimat sisaldust, mille juures on antud ainet võimalik usaldusväärselt tuvastada. Kõige vähem tundlikud on keemilised analüüsimeetodid ja kvalitatiivsed reaktsioonid. Kõige tundlikumad ensümaatilised ja bioloogilised meetodid ainete üksikute makromolekulide tuvastamiseks. Reaalselt kasutatavatest on tundlikumad radiokeemilised, katalüütilised ja fluorestsentsmeetodid, mis võimaldavad määrata kuni 10 -9%; spektrofotomeetriliste meetodite tundlikkus 10 -3 -10 -6%; potentsiomeetriline 10 -2%.

Mõiste "analüüsi täpsus" hõlmab samaaegselt kahte mõistet: saadud tulemuste reprodutseeritavus ja õigsus.

Reprodutseeritavus - iseloomustab analüüsi tulemuste hajumist võrreldes keskmise väärtusega.

õigsus - peegeldab erinevust aine tegeliku ja leitud sisalduse vahel. Analüüsi täpsus sõltub instrumentide kvaliteedist, analüütiku kogemusest jne. Analüüsi täpsus ei saa olla suurem kui kõige vähem täpse mõõtmise täpsus. See tähendab, et kui tiitrimise täpsus on ±0,2 ml pluss lekkeviga on samuti ±0,2 ml, s.o. kokku ±0,4 ml, siis 20 ml tiitri tarbimisel on viga 0,2%. Proovi ja tiitri koguse vähenemisega väheneb täpsus. Seega võimaldab titrimeetriline analüüs määrata suhtelise veaga ± (0,2-0,3)%. Igal meetodil on oma täpsus. Analüüsimisel on oluline mõista järgmisi mõisteid:

Karmid vead - on vaatleja valearvestus või analüüsimetoodika rikkumine. Sellised tulemused jäetakse ebausaldusväärseks.

Süstemaatilised vead - kajastavad analüüsi tulemuste õigsust. Need moonutavad mõõtmistulemusi reeglina ühes suunas mingi konstantse väärtuse võrra. Süstemaatilisi vigu saab osaliselt kõrvaldada paranduste, instrumentide kalibreerimise jms sisseviimisega.

Juhuslikud vead - peegeldavad analüüsi tulemuste reprodutseeritavust. Neid kutsuvad kontrollimatud muutujad. Juhuslike vigade aritmeetiline keskmine kipub olema null. Seetõttu on arvutuste tegemiseks vaja kasutada mitte üksikute mõõtmiste tulemusi, vaid mitme paralleelse määramise keskmist.

Absoluutne viga- tähistab saadud tulemuse ja tegeliku väärtuse erinevust. Seda viga väljendatakse samades ühikutes kui määratav väärtus.

Suhteline viga definitsioon on võrdne absoluutvea ja määratud väärtuse tegeliku väärtuse suhtega. Tavaliselt väljendatakse seda protsentides või protsentides.

Suhteliste vigade väärtused sõltuvad analüüsi tegemise meetodist ja sellest, milline on analüüsitav aine - üksikaine ja paljude komponentide segu.

Suhteline viga üksikute ainete uurimisel spektrofotomeetrilisel meetodil on 2-3%, IR spektrofotomeetria järgi - 5-12%; vedelikkromatograafia 3-4%; potentsiomeetria 0,3-1%. Kombineeritud meetodid vähendavad tavaliselt analüüsi täpsust. Bioloogilised meetodid on kõige vähem täpsed - nende suhteline viga ulatub 50% -ni.

Raviainete identifitseerimise meetodid.

Raviainete testimisel on kõige olulisem näitaja nende tuvastamine või nagu farmakopöa artiklites tavaks, ehtsus. Raviainete ehtsuse määramiseks kasutatakse arvukalt meetodeid. Kõik peamised ja üldised on kirjeldatud GF X1 väljaandes, väljaandes 1. Ajalooliselt on põhirõhk olnud keemilisel, sh. kvalitatiivsed värvusreaktsioonid, mis iseloomustavad teatud ioonide või funktsionaalrühmade esinemist orgaanilistes ühendites, samal ajal kasutati laialdaselt ka füüsikalisi meetodeid. Tänapäevastes farmakopöades on rõhk füüsikalis-keemilistel meetoditel.

Keskendume peamisele füüsilised meetodid.

Üsna stabiilne konstant, mis iseloomustab ainet, selle puhtust ja autentsust, on sulamistemperatuur. Seda indikaatorit kasutatakse laialdaselt ravimainete ainete standardiseerimiseks. Sulamistemperatuuri määramise meetodeid kirjeldatakse üksikasjalikult GF X1-s, saate seda ise laboritundides proovida. Puhtal ainel on konstantne sulamistemperatuur, kuid lisandite lisamisel sulamistemperatuur reeglina väga oluliselt väheneb. Seda efekti nimetatakse segamistestiks ja see on segamise test, mis võimaldab kindlaks teha ravimi ehtsuse standardproovi või teadaoleva proovi juuresolekul. Siiski on erandeid, kuna ratseemiline sulfokaforhape sulab kõrgemal temperatuuril ja indometatsiini erinevad kristalsed vormid erinevad sulamistemperatuuri poolest. Need. see meetod on üks näitajatest, mis iseloomustavad nii toote puhtust kui ka autentsust.

Mõne ravimi puhul kasutatakse sellist indikaatorit nagu tahkestumise temperatuur. Teine ainet iseloomustav näitaja on destilleerimise keemispunkti või temperatuuri piirid. See indikaator iseloomustab vedelaid aineid, näiteks etüülalkoholi. Keemistemperatuur on vähem iseloomulik näitaja, see sõltub tugevalt atmosfääri rõhust, segude või aseotroopide tekke võimalusest ja seda kasutatakse üsna harva.

Muude füüsikaliste meetodite hulgas tuleb märkida määramist tihedus, viskoossus. Standardseid analüüsimeetodeid on kirjeldatud dokumendis SP X1. Ravimi ehtsust iseloomustav meetod on ka selle lahustuvuse määramine erinevates lahustites. Vastavalt GF X1 ed. Seda meetodit iseloomustatakse kui omadust, mis võib olla testitava toote indikatiivne omadus. Koos sulamistemperatuuriga on aine lahustuvus üks parameetreid, mille abil tehakse kindlaks peaaegu kõigi raviainete ehtsus ja puhtus. Farmakopöa kehtestab ainete ligikaudse gradatsiooni lahustuvuse järgi väga kergesti lahustuvast praktiliselt lahustumatuni. Sel juhul loetakse lahustunuks aine, mille lahuses läbiva valguse käes aineosakesi ei täheldata.

Füüsikalised ja keemilised meetodid autentsuse määramiseks.

Ainete ehtsuse määramisel on kõige informatiivsemad füüsikalis-keemilised meetodid, mis põhinevad ainete molekulide omadustel suhelda mis tahes füüsikaliste teguritega. Füüsikalised ja keemilised meetodid hõlmavad järgmist:

1. Spektrimeetodid
UV-spektroskoopia
Spektroskoopia nähtavas valguses
IR-spektroskoopia
Fluorestsentsspektroskoopia
Aatomabsorptsioonspektroskoopia
Röntgenikiirguse analüüsimeetodid
Tuumamagnetresonants
Röntgendifraktsioonianalüüs

2. Analüüsi sorptsioonimeetodid
Õhukese kihi kromatograafia
Gaas-vedelik kromatograafia
Suure jõudlusega vedelikkromatograafia
Elektroforees
Iontoforees
Geelkromatograafia

3.Analüüsi massimeetodid
Massispektromeetria
Kromatomassi spektromeetria

4. Elektrokeemilised analüüsimeetodid
polarograafia
Elektronide paramagnetiline resonants

5. Standardnäidiste kasutamine

Vaatleme lühidalt farmaatsias kasutatavaid analüüsimeetodeid. Kõik need analüüsimeetodid loeb teile detsembri lõpus üksikasjalikult ette professor V.I. Myagkikh. Raviainete ehtsuse määramiseks kasutatakse mõningaid spektraalseid meetodeid. Kõige usaldusväärsem on IR-spektroskoopia madala sagedusega piirkonna kasutamine, kus neeldumisribad peegeldavad seda ainet kõige usaldusväärsemalt. Nimetan seda piirkonda ka sõrmejälgede alaks. Reeglina kasutatakse autentsuse kinnitamiseks standardproovi ja uuritava proovi standardtingimustes võetud IR-spektrite võrdlust. Kõikide imendumisribade kokkulangevus kinnitab ravimi autentsust. UV- ja nähtava spektroskoopia kasutamine on vähem usaldusväärne, kuna spektri olemus ei ole individuaalne ja peegeldab ainult teatud kromofoori orgaanilise ühendi struktuuris. Aatomabsorptsioonspektroskoopiat ja röntgenspektroskoopiat kasutatakse anorgaaniliste ühendite analüüsimiseks, keemiliste elementide tuvastamiseks. Tuumamagnetresonants võimaldab tuvastada orgaaniliste ühendite struktuuri ja on usaldusväärne meetod autentimiseks, kuid instrumentide keerukuse ja kõrge hinna tõttu kasutatakse seda väga harva ja reeglina ainult uurimiseesmärkidel. . Fluorestsentsspektroskoopia on rakendatav ainult teatud klassi ainete puhul, mis UV-kiirgusega kokkupuutel fluorestseerivad. Sel juhul on fluorestsentsi spekter ja fluorestsentsi ergastusspekter üsna individuaalsed, kuid sõltuvad tugevalt keskkonnast, milles antud aine on lahustunud. Seda meetodit kasutatakse sagedamini kvantifitseerimiseks, eriti väikeste koguste puhul, kuna see on üks tundlikumaid.

Röntgendifraktsioonanalüüs on kõige usaldusväärsem meetod aine struktuuri kinnitamiseks, see võimaldab teil määrata aine täpse keemilise struktuuri, kuid see lihtsalt ei sobi autentsuse vooanalüüsiks ja seda kasutatakse eranditult teaduslikel eesmärkidel. .

Sorptsiooni analüüsimeetodid leidnud väga laialdast rakendust farmaatsiaanalüüsis. Neid kasutatakse autentsuse, lisandite olemasolu ja kvantifitseerimiseks. Nende meetodite ja kasutatavate seadmete kohta peetakse teile üksikasjalikku loengut professor V.I. Myagkikh, Shimadzu piirkondlik esindaja, üks peamisi kromatograafiaseadmete tootjaid. Need meetodid põhinevad ainete sorptsiooni-desorptsiooni põhimõttel kandevoolu teatud kandjatel. Sõltuvalt kandjast ja sorbendist jaotatakse need õhukese kihi kromatograafiaks, vedelikukolonniks (analüütiliseks ja preparatiivseks, sh HPLC), gaas-vedelikkromatograafiaks, geelfiltratsiooniks, iontoforeesiks. Keeruliste valguobjektide analüüsimiseks kasutatakse kahte viimast meetodit. Meetodite oluliseks puuduseks on nende suhtelisus, s.o. Kromatograafia abil saab ainet ja selle kogust iseloomustada ainult standardainega võrreldes. Olulise eelisena tuleb aga märkida – meetodi kõrge usaldusväärsus ja täpsus, sest. kromatograafias tuleb igasugune segu eraldada üksikuteks aineteks ja analüüsi tulemuseks on just üksikaine.

Massispektromeetrilisi ja elektrokeemilisi meetodeid kasutatakse autentsuse kinnitamiseks harva.

Erilise koha hõivavad autentsuse määramise meetodid võrreldes standardprooviga. Seda meetodit kasutatakse välismaistes farmakopöades üsna laialdaselt komplekssete makromolekulide, komplekssete antibiootikumide, mõnede vitamiinide ja muude eriti kiraalseid süsinikuaatomeid sisaldavate ainete ehtsuse määramiseks, kuna optiliselt aktiivse aine autentsust on raske või isegi võimatu määrata teistega. meetodid. Väljatöötatud ja heakskiidetud farmakopöa monograafia põhjal tuleks välja töötada ja välja anda standardproov. Venemaal on olemas ja kasutusel vaid üksikud standardproovid ning analüüsiks kasutatakse kõige sagedamini nn RSO-sid – tööstandardseid proove, mis valmistatakse vahetult enne katset teadaolevatest ainetest või vastavatest ainetest.

Autentimise keemilised meetodid.

Raviainete identifitseerimist keemiliste meetoditega kasutatakse peamiselt anorgaaniliste ravimainete puhul, kuna muud meetodid pole enamasti saadaval või nõuavad keerukaid ja kulukaid seadmeid. Nagu juba mainitud, on anorgaanilised elemendid kergesti tuvastatavad aatomabsorptsiooni või röntgenspektroskoopia abil. Meie farmakopöa monograafiates kasutatakse tavaliselt keemilisi autentimise meetodeid. Need meetodid jagunevad tavaliselt järgmisteks osadeks:

Anioonide ja katioonide sadestumisreaktsioonid. Tüüpilised näited on naatriumi- ja kaaliumiioonide sadestamisreaktsioonid vastavalt (tsinkuranüülatsetaadi ja viinhappega):

Selliseid reaktsioone kasutatakse väga palju ja neid käsitletakse üksikasjalikult farmatseutilise keemia eriosas, mis käsitleb anorgaanilisi aineid.

Redoksreaktsioonid.

Redoksreaktsioone kasutatakse metallide redutseerimiseks oksiididest. Näiteks hõbe formaliinoksiidist (hõbepeegli reaktsioon):

Difenüülamiini oksüdatsioonireaktsioon on nitraatide ja nitritite ehtsuse kontrollimise aluseks:

Anioonide neutraliseerimise ja lagunemise reaktsioonid.

Karbonaadid ja süsivesinikud moodustavad mineraalhapete toimel süsihappe, mis laguneb süsinikdioksiidiks:

Samamoodi lagunevad nitritid, tiosulfaadid ja ammooniumisoolad.

Värvitu leegi värvimuutused. Naatriumsoolad värvivad leegi kollaseks, vaskroheliseks, kaaliumlillaks, kaltsiumtellistest punaseks. Just seda põhimõtet kasutatakse.

Ainete lagunemine pürolüüsi käigus. Meetodit kasutatakse joodi, arseeni, elavhõbeda preparaatide jaoks. Praegu kasutatavatest on kõige iseloomulikum aluselise vismutnitraadi reaktsioon, mis kuumutamisel laguneb, moodustades lämmastikoksiidid:

Organoelementide raviainete identifitseerimine.

Kvalitatiivset elementanalüüsi kasutatakse orgaanilises molekulis arseeni, väävlit, vismutit, elavhõbedat, fosforit ja halogeene sisaldavate ühendite tuvastamiseks. Kuna nende elementide aatomid ei ole ioniseeritud, kasutatakse nende tuvastamiseks eelmineraliseerimist kas pürolüüsi või uuesti väävelhappega pürolüüsi teel. Väävel määratakse vesiniksulfiidi reaktsioonil kaaliumnitroprussiidi või pliisooladega. Jood määratakse ka pürolüüsi teel elementaarse joodi vabanemise teel. Kõigist nendest reaktsioonidest pakub huvi arseeni tuvastamine, mitte niivõrd ravimina - neid praktiliselt ei kasutata, vaid lisandite jälgimise meetodina, kuid sellest lähemalt hiljem.

Orgaaniliste ravimainete ehtsuse testimine. Orgaaniliste ravimainete autentsuse kontrollimiseks kasutatavad keemilised reaktsioonid võib jagada kolme põhirühma:
1. Orgaaniliste ühendite üldised keemilised reaktsioonid ;
2. Soolade ja kompleksühendite moodustumise reaktsioonid;
3. Reaktsioonid, mida kasutatakse orgaaniliste aluste ja nende soolade tuvastamiseks.

Kõik need reaktsioonid põhinevad lõppkokkuvõttes funktsionaalse analüüsi põhimõtetel, s.o. molekuli reaktiivne kese, mis reageerides annab vastava vastuse. Enamasti on see aine teatud omaduste muutus: värvus, lahustuvus, agregatsiooni olek jne.

Vaatleme mõnda näidet keemiliste reaktsioonide kasutamisest ravimainete tuvastamiseks.

1. Nitreerimise ja nitroseerimise reaktsioonid. Neid kasutatakse üsna harva, näiteks fenobarbitaali, fenatsetiini, dikaiini tuvastamiseks, kuigi neid ravimeid ei kasutata meditsiinipraktikas peaaegu kunagi.

2. Diasotiseerimise ja asosidestamise reaktsioonid. Neid reaktsioone kasutatakse primaarsete amiinide avamiseks. Diasotiseeritud amiin ühineb beeta-naftooliga, andes iseloomuliku punase või oranži värvuse.

3. Halogeenimisreaktsioonid. Kasutatakse alifaatsete kaksiksidemete avamiseks – broomivee lisamisel lisandub kaksiksidemele broom ja lahus muutub värvituks. Aniliini ja fenooli iseloomulik reaktsioon on see, et nende töötlemisel broomveega tekib tribromoderivaat, mis sadestub.

4. Karbonüülühendite kondensatsioonireaktsioonid. Reaktsioon seisneb aldehüüdide ja ketoonide kondenseerimises primaarsete amiinide, hüdroksüülamiini, hüdrasiinide ja semikarbasiidiga:

Saadud asometiinidel (või Schiffi alustel) on iseloomulik kollane värv. Reaktsiooni kasutatakse näiteks sulfoonamiidide tuvastamiseks. Aldehüüdina kasutatakse 4-dimetüülaminobensaldehüüdi.

5. Oksüdatiivsed kondensatsioonireaktsioonid. Selle aluseks on oksüdatiivne lõhustamine ja asometiinvärvi moodustumine ninhüdriini reaktsioon. Seda reaktsiooni kasutatakse laialdaselt α- ja β-aminohapete avastamiseks ja fotokolorimeetriliseks määramiseks, mille juuresolekul tekib intensiivne tumesinine värvus. See on tingitud diketohüdrindülideen-diketohüdramiini asendatud soola moodustumisest, mis on ninhüdriini liia ja redutseeritud ninhüdriini kondensatsiooniprodukt koos ammoniaagiga, mis vabaneb testitava aminohappe oksüdatsiooni käigus:

Fenoolide avamiseks kasutatakse triarüülmetaanvärvide moodustumise reaktsiooni. Seega moodustavad formaldehüüdiga interakteeruvad fenoolid värvaineid. Sarnased reaktsioonid hõlmavad resortsinooli interaktsiooni ftaalanhüdriidiga, mis viib fluorestseeruva värvaine - fluorestseiini - moodustumiseni.

Kasutatakse ka palju muid reaktsioone.

Eriti huvitavad on reaktsioonid soolade ja komplekside moodustumisega. Raua (III), vase (II), hõbeda, koobalti, elavhõbeda (II) jt anorgaanilised soolad orgaaniliste ühendite ehtsuse kontrollimiseks: karboksüülhapped, sealhulgas aminohapped, barbituurhappe derivaadid, fenoolid, sulfoonamiidid, mõned alkaloidid. Soolade ja kompleksühendite moodustumine toimub vastavalt üldskeemile:

R-COOH + MX = R-COOM + HX

Amiinide kompleksne moodustumine toimub sarnaselt:

R-NH2 + X = R-NH2 X

Üks farmatseutilise analüüsi kõige levinumaid reaktiive on raud(III)kloriidi lahus. Koostoime fenoolidega moodustab fenoksiidide värvilise lahuse, need on sinise või lilla värvusega. Seda reaktsiooni kasutatakse fenooli või resortsinooli avastamiseks. Kuid meta-asendatud fenoolid ei moodusta värvilisi ühendeid (tümool).

Vasesoolad moodustavad kompleksühendeid sulfoonamiididega, koobaltisoolad barbituraatidega. Paljusid neist reaktsioonidest kasutatakse ka kvantitatiivseks määramiseks.

Orgaaniliste aluste ja nende soolade identifitseerimine. Seda meetodite rühma kasutatakse kõige sagedamini valmisvormides, eriti lahenduste uurimisel. Nii et orgaaniliste amiinide soolad moodustavad leeliste lisamisel aluse sademe (näiteks papaveriinvesinikkloriidi lahus) ja vastupidi, orgaaniliste hapete soolad, kui lisatakse mineraalhapet, orgaanilise ühendi sade. (näiteks naatriumsalitsülaat). Orgaaniliste aluste ja nende soolade tuvastamiseks kasutatakse laialdaselt niinimetatud sadestamisreagente. Teada on üle 200 sadestava reaktiivi, mis moodustavad orgaaniliste ühenditega vees lahustumatuid liht- või komplekssooli. Kõige sagedamini kasutatavad lahendused on toodud SP 11. väljaande teises köites. Näide on järgmine:
Scheibleri reaktiiv - fosfovolframhape;
Pikriinhape
Styphnic hape
Pikraamhape

Kõiki neid reaktiive kasutatakse orgaaniliste aluste (näiteks nitroksoliini) sadestamiseks.

Tuleb märkida, et kõiki neid keemilisi reaktsioone kasutatakse ravimite identifitseerimiseks mitte üksi, vaid kombinatsioonis teiste, kõige sagedamini füüsikalis-keemiliste meetoditega, nagu kromatograafia, spektroskoopia. Üldiselt tuleb tähelepanu pöörata asjaolule, et raviainete autentsuse probleem on võtmetähtsusega, sest see asjaolu määrab ravimi kahjutuse, ohutuse ja efektiivsuse, seega tuleb sellele näitajale pöörata suurt tähelepanu ja sellest ei piisa, et kinnitada aine autentsust ühe meetodiga.

Üldnõuded puhtuskatsetele.

Teine sama oluline ravimi kvaliteedi näitaja on puhtus. Kõiki ravimeid, olenemata nende valmistamise meetodist, kontrollitakse puhtuse suhtes. See määrab lisandite sisalduse preparaadis. Tinglikult on võimalik lisandeid jagada kahte rühma: esimene, lisandid, millel on organismile farmakoloogiline toime; teine, lisandid, mis näitab aine puhastusastet. Viimased ei mõjuta ravimi kvaliteeti, kuid vähendavad suurtes kogustes selle annust ja vähendavad vastavalt ka ravimi aktiivsust. Seetõttu kehtestavad kõik farmakopöad nendele ravimite lisanditele teatud piirid. Seega on ravimi hea kvaliteedi peamiseks kriteeriumiks lisandite puudumine, mis on oma olemuselt võimatu. Lisandite puudumise kontseptsioon on seotud ühe või teise meetodi avastamispiiriga.

Ainete ja nende lahuste füüsikalised ja keemilised omadused annavad ligikaudse ettekujutuse lisandite olemasolust ravimites ja reguleerivad nende kasutussobivust. Seetõttu viiakse hea kvaliteedi hindamiseks koos autentsuse kindlakstegemise ja kvantitatiivse sisalduse määramisega läbi mitmeid füüsikalisi ja keemilisi katseid, et kinnitada selle puhtusastet:

Läbipaistvus ja hägususaste tehakse hägususstandardiga võrreldes ja läbipaistvus määratakse lahustiga võrreldes.

Kromaatilisus. Värvuse astme muutus võib olla tingitud:
a) kõrvalise värvilise lisandi olemasolu;
b) keemiline muutus aines endas (oksüdatsioon, interaktsioon Me +3 ja +2-ga või muud keemilised protsessid, mis tekivad värviliste toodete moodustumisel. Näiteks:

Resortsinool muutub säilitamise ajal kollaseks oksüdatsiooni tõttu õhuhapniku toimel kinoonide moodustumiseks. Näiteks rauasoolade juuresolekul omandab salitsüülhape raudsalitsülaatide moodustumise tõttu purpurse värvuse.

Värvi hindamine toimub põhikogemuse võrdlemisel värvistandarditega ja värvituse määramisel lahustiga.

Väga sageli kasutatakse orgaaniliste ainete lisandite tuvastamiseks testi, mis põhineb nende koostoimel kontsentreeritud väävelhappega, mis võib toimida oksüdeeriva või dehüdreeriva ainena. Selliste reaktsioonide tulemusena tekivad värvilised tooted.Saadud värvi intensiivsus ei tohiks ületada vastavat värvistandardit.

Pulbriliste ravimite valgesusastme määramine– füüsikaline meetod, mis sisaldub esmakordselt GF X1-s. Tahkete ravimainete valgesuse (tooni) astet saab hinnata erinevate instrumentaalsete meetoditega, mis põhinevad proovilt peegelduva valguse spektraalsetel omadustel. Selleks kasutatakse peegeldusvõimet, kui proovi valgustatakse valge valgusega, mis on saadud spetsiaalsest allikast, spektraaljaotusega või lastakse läbi valgusfiltrite (läbilaskega max 614 nm (punane) või 439 nm (sinine)). Samuti saate mõõta rohelise filtri läbinud valguse peegeldust.

Raviainete valgesuse täpsemat hindamist saab teha peegeldusspektrofotomeetrite abil. Valgusastme väärtus ja heledusaste on raviainete varjunditega valgete ja valgete kvaliteedi tunnused. Nende lubatud piirid on reguleeritud eraartiklites.

Happesuse, aluselisuse, pH määramine.

Nende näitajate muutus on tingitud:
a) ravimi enda keemilise struktuuri muutus:

b) ravimi koostoime konteineriga, näiteks novokaiinilahuse leeliselisuse lubatud piiride ületamine klaasi leostumise tõttu;
c) gaasiliste saaduste (CO 2, NH 3) neeldumine atmosfäärist.

Ravimite kvaliteedi määramine nende näitajate järgi toimub mitmel viisil:

a) indikaatori värvi muutmisega määratakse näiteks boorhappe mineraalhapete segu metüülpunaga, mis ei muuda oma värvi nõrga boorhappe toimel, kuid muutub roosaks, kui sisaldab mineraali lisandeid happed.

b) titrimeetriline meetod - näiteks I 2 10% alkoholilahuse säilitamisel tekkiva vesinikjodiidhappe sisalduse lubatud piiri määramiseks tiitritakse leelisega (mitte rohkem kui 0,3 ml 0,1 mol / l NaOH-d). titrandi mahu järgi). (Formaldehüüdi lahus – tiitritakse leelisega fenoolftaleiini juuresolekul).

Mõnel juhul määrab Global Fund titrandi mahu happesuse või aluselisuse määramiseks.

Mõnikord lisatakse järjest kaks tiitritud lahust: esmalt hapet ja seejärel leelist.

c) pH väärtuse määramisega - mitmete ravimite (ja tingimata kõigi süstelahuste) jaoks vastavalt NTD-le on ette nähtud pH väärtuse määramine.

Aine valmistamise tehnikad happesuse, aluselisuse, pH uurimisel

1. NTD-s määratletud teatud kontsentratsiooniga lahuse valmistamine (vees lahustuvate ainete jaoks)
2. Vees lahustumatute jaoks valmistatakse teatud kontsentratsiooniga suspensioon ja määratakse filtraadi happe-aluse omadused.
3. Veega segunematute vedelate preparaatide puhul segatakse veega, seejärel eraldatakse veekiht ja määratakse selle happe-aluse omadused.
4. Lahustumatute tahkete ainete ja vedelike puhul võib määramise teha otse suspensioonis (ZnO)

Ligikaudset pH väärtust (kuni 0,3 ühikut) saab määrata indikaatorpaberi või universaalse indikaatori abil.

Kolorimeetriline meetod põhineb indikaatorite omadusel muuta oma värvi teatud pH väärtuste vahemikus. Katsete läbiviimiseks kasutatakse konstantse vesinikioonide kontsentratsiooniga puhverlahuseid, mis erinevad üksteisest pH väärtusega 0,2. Selliste lahuste seeriale ja uuritavale lahusele lisatakse sama kogus (2-3 tilka) indikaatorit. Vastavalt värvi kokkulangemisele ühe puhverlahusega hinnatakse uuritava lahuse söötme pH väärtust.

Lenduvate ainete ja vee määramine.

Lenduvad ained võivad sattuda ravimitesse kas lahustitest või vaheühenditest halva puhastamise tõttu või lagunemissaaduste kogunemise tõttu. Raviaines sisalduv vesi võib olla kapillaaridena, imendunud seotuna, keemiliselt seotud (hüdraatunud ja kristalne) või vaba.

Lenduvate ainete ja vee määramiseks kasutatakse kuivatamist, destilleerimist ja tiitrimist Fischeri lahusega.

kuivatamise meetod. Meetodit kasutatakse kuivatamisel tekkiva kaalukaotuse määramiseks. Kaod võivad olla tingitud hügroskoopse niiskuse ja lenduvate ainete sisaldusest aines. Kuivatatakse pudelis kindlal temperatuuril konstantse kaaluni. Sagedamini hoitakse ainet temperatuuril 100–105 ºС, kuid kuivatamise ja konstantse massini viimise tingimused võivad olla erinevad.

Mõnede toodete puhul saab lenduvaid aineid määrata süütemeetodil. Ainet kuumutatakse tiiglis, kuni lenduvad ained on täielikult eemaldatud. seejärel tõsta järk-järgult temperatuuri kuni täieliku kaltsineerimiseni punasel kuumusel. Näiteks GPC reguleerib naatriumkarbonaadi lisandite määramist naatriumvesinikkarbonaadist ravimaines kaltsineerimismeetodil. Naatriumvesinikkarbonaat laguneb naatriumkarbonaadiks, süsinikdioksiidiks ja veeks:

Teoreetiliselt on kaalulangus 36,9%. GPC andmetel peaks massikadu olema vähemalt 36,6%. Teoreetilise ja GPC massikao erinevus määrab aine naatriumkarbonaadi lisandite lubatud piiri.

destilleerimise meetod GF 11-s nimetatakse "vee määratluseks", see võimaldab teil määrata hügroskoopset vett. See meetod põhineb kahe segunematu vedeliku aurude füüsikalistel omadustel. Vee ja orgaanilise lahusti segu destilleerub madalamal temperatuuril kui kumbki neist vedelikest. GPC1 soovitab kasutada orgaanilise lahustina tolueeni või ksüleeni. Veesisaldus uuritavas aines määratakse selle mahu järgi vastuvõtjas pärast destilleerimisprotsessi lõppu.

Tiitrimine Fisheri reaktiiviga. Meetod võimaldab määrata nii vaba kui ka kristalse vee kogusisaldust orgaanilistes, anorgaanilistes ainetes, lahustites. Selle meetodi eeliseks on täitmise kiirus ja selektiivsus vee suhtes. Fisheri lahus on vääveldioksiidi, joodi ja püridiini lahus metanoolis. Meetodi puuduste hulgas on lisaks tiheduse rangele järgimisele ka vee määramise võimatus ainete juuresolekul, mis reageerivad reaktiivi komponentidega.

Tuha määratlus.

Tuhasisaldus on tingitud mineraalsetest lisanditest, mis esinevad orgaanilistes ainetes algsaadustest (peamiselt metallikatioonidest) abimaterjalide ja seadmete saamise protsessis, s.o. iseloomustab anorgaaniliste lisandite esinemist orgaanilistes ainetes.

aga) kokku tuhk- määratakse põlemistulemustega (tuhastumine, mineraliseerumine) kõrgel temperatuuril, iseloomustab kõigi anorgaaniliste ainete-lisandite summat.

Tuha koostis:
Karbonaadid: CaCO 3, Na 2 CO 3, K 2 CO 3, PbCO 3
Oksiidid: CaO, PbO
Sulfaadid: CaSO4
Kloriidid: CaCl2
Nitraadid: NaNO 3

Taimsetest materjalidest ravimite saamisel võib mineraalseid lisandeid põhjustada taimede tolmureostus, mikroelementide ja anorgaaniliste ühendite imendumine pinnasest, veest jne.

b) Vesinikkloriidhappes lahustumatu tuhk, mis saadakse pärast kogutuha töötlemist lahjendatud HCl-ga. Tuha keemiliseks koostiseks on raskmetallide kloriidid (AgCl, HgCl 2, Hg 2 Cl 2), s.o. väga mürgised lisandid.

sisse) sulfaattuhk- Sulfaattuhk määratakse paljude orgaaniliste ainete hea kvaliteedi hindamisel. Iseloomustab lisandeid Mn + n stabiilses sulfaatvormis. Saadud sulfaattuhka (Fe 3 (SO 4) 2, PbSO 4, CaSO 4) kasutatakse järgnevaks raskmetallide lisandite määramiseks.

Anorgaaniliste ioonide lisandid - C1 -, SO 4 -2, NH 4 +, Ca +2, Fe +3 (+2) , Pv +2, As +3 (+5)

Lisandid:
a) mürgised lisandid (CN-i segu joodis),
b) antagonistliku toimega (Na ja K, Mg ja Ca)

Raviaines lubamatute lisandite puudumine määratakse negatiivse reaktsiooniga vastavate reagentidega. Sel juhul viiakse võrdlus läbi lahuse osaga, millele lisatakse kõik reaktiivid, välja arvatud peamine, mis selle lisandi avab (kontrollkatse). Positiivne reaktsioon näitab lisandi olemasolu ja ravimi halba kvaliteeti.

Lubatud lisandid - lisandid, mis ei mõjuta farmakoloogilist toimet ja mille sisaldus on NTD-ga kehtestatud väikestes kogustes lubatud.

Ravimite ioonide lisandite sisalduse lubatud piiri määramiseks kasutatakse võrdluslahuseid, mis sisaldavad vastavat iooni kindlas kontsentratsioonis.

Teatud ravimaineid testitakse lisandite esinemise suhtes tiitrimise teel, näiteks norsulfasooli lisandi määramiseks ravimis ftalasool. Norsulfasooli segu ftalasoolis määratakse kvantitatiivselt nitritomeetriliselt. 1 g ftalasooli tiitrimisel ei tohiks kuluda rohkem kui 0,2 ml 0,1 mol/l NaNO 2 .

Üldnõuded reaktsioonidele, mida kasutatakse vastuvõetavate ja vastuvõetamatute lisandite katsetes:
1. tundlikkus,
2. spetsiifilisus,
3. kasutatud reaktsiooni reprodutseeritavus.

Värviliste produktide moodustumisega kulgevate reaktsioonide tulemusi vaadeldakse peegeldunud valguses tuhmvalgel taustal ning valget sadet hägususe ja opalestsentsi kujul vaadeldakse läbiva valguse käes mustal taustal.

Instrumentaalsed meetodid lisandite määramiseks.

Analüüsimeetodite arenedes suurenevad pidevalt nõuded raviainete ja ravimvormide puhtusele. Kaasaegsetes farmakopöades kasutatakse koos vaadeldavate meetoditega mitmesuguseid instrumentaalseid meetodeid, mis põhinevad ainete füüsikalis-keemilistel, keemilistel ja füüsikalistel omadustel. UV- ja nähtava spektroskoopia kasutamine annab harva positiivseid tulemusi ja see on tingitud asjaolust, et lisandite, eriti orgaaniliste ravimite struktuur on reeglina. See on lähedane ravimi enda struktuurile, mistõttu neeldumisspektrid erinevad vähe ning lisandite kontsentratsioon on tavaliselt põhiaine omast kümneid kordi madalam, mis muudab diferentsiaalanalüüsi meetodid sobimatuks ja võimaldab lisandit hinnata vaid ligikaudselt. , st nagu seda tavaliselt poolkvantitatiivselt nimetatakse. Tulemused on mõnevõrra paremad, kui üks ainetest, eriti lisand, moodustab kompleksühendi, teine ​​aga mitte, siis erinevad spektrite maksimumid oluliselt ja lisandeid saab juba kvantitatiivselt määrata.

Viimastel aastatel on ettevõtetesse ilmunud IR-Fourier instrumendid, mis võimaldavad määrata nii põhiaine kui ka lisandite, eriti vee, sisaldust proovi hävitamata, kuid nende kasutamist piirab instrumentide kõrge hind ja standardiseeritud analüüsi puudumine. meetodid.

Suurepärased lisandite tulemused on võimalikud, kui lisand fluorestseerub UV-valguses. Selliste analüüside täpsus on väga kõrge, nagu ka nende tundlikkus.

Laialdane rakendus puhtuse testimiseks ja lisandite kvantitatiivseks määramiseks nii ravimainetes (ainetes) kui ka ravimvormides, mis võib-olla pole vähem oluline, sest. ravimite säilitamisel tekib palju lisandeid, mis saadakse kromatograafiliste meetoditega: HPLC, TLC, GLC.

Need meetodid võimaldavad erinevalt teistest meetoditest määrata lisandeid kvantitatiivselt ja iga lisandit eraldi. HPLC ja GLC kromatograafia meetodeid käsitleb üksikasjalikult loengus prof. Myagkikh V.I. Keskendume ainult õhukese kihi kromatograafiale. Õhukese kihi kromatograafia meetodi avastas vene teadlane Tsvet ja see eksisteeris alguses kromatograafiana paberil. Õhukese kihi kromatograafia (TLC) põhineb analüüsitava segu komponentide liikumiskiiruste erinevusel lamedas õhukeses sorbendikihis, kui lahusti (eluent) liigub läbi selle. Sorbendid on silikageel, alumiiniumoksiid, tselluloos. Polüamiid, eluendid - erineva polaarsusega orgaanilised lahustid või nende segud omavahel ja mõnikord ka hapete või leeliste ja soolade lahustega. Eraldusmehhanism on tingitud jaotuskoefitsientidest uuritava aine sorbendi ja vedela faasi vahel, mis omakorda on seotud paljudega, sealhulgas ainete keemiliste ja füüsikalis-keemiliste omadustega.

TLC-s kaetakse alumiinium- või klaasplaadi pind sorbendi suspensiooniga, kuivatatakse õhu käes ja aktiveeritakse lahusti (niiskuse) jälgede eemaldamiseks. Praktikas kasutatakse tavaliselt kaubanduslikult toodetud plaate, millel on fikseeritud sorbendi kiht. Sorbendikihile kantakse analüüsitud lahuse tilgad mahuga 1-10 μl. Plaadi serv on sukeldatud lahustisse. Katse viiakse läbi spetsiaalses kambris - kaanega suletud klaasanumas. Lahusti liigub läbi kihi kapillaarjõudude toimel. Võimalik on mitme erineva segu samaaegne eraldamine. Eraldamise efektiivsuse suurendamiseks kasutatakse mitmekordset elueerimist kas ristisuunas sama või erineva eluendiga.

Pärast protsessi lõppu plaat kuivatatakse õhu käes ja komponentide kromatograafiliste tsoonide asukohti määratakse mitmel viisil, näiteks kiiritades UV-kiirgusega, pihustades värvainetega ja hoitakse joodiaurudes. Saadud jaotusmustril (kromatogrammil) on segu komponentide kromatograafilised tsoonid paigutatud täppide kujul vastavalt nende sorbeerumisvõimele selles süsteemis.

Kromatograafiliste tsoonide asukohta kromatogrammil iseloomustab R f väärtus. mis võrdub i-nda komponendi poolt läbitud tee l i suhtega alguspunktist teele Vп R f = l i / l.

R f väärtus sõltub jaotus (adsorptsiooni) koefitsiendist K і ning liikuva (V p) ja statsionaarse (V n) faasi ruumalade suhtest.

TLC-s eraldumist mõjutavad mitmed tegurid: eluendi koostis ja omadused, sorbendi olemus, peenus ja poorsus, temperatuur, niiskus, sorbendikihi suurus ja paksus ning kambri mõõtmed. Katsetingimuste standardiseerimine võimaldab määrata R f suhtelise standardhälbega 0,03.

Segu komponentide identifitseerimine toimub Rf väärtuste järgi. Ainete kvantitatiivset määramist tsoonides saab läbi viia otse sorbendikihil kromatograafilise tsooni pindala, komponendi fluorestsentsi intensiivsuse või selle kombinatsiooni sobiva reaktiiviga, radiokeemiliste meetoditega. Automaatseid skaneerimisseadmeid kasutatakse ka kromatograafiliste tsoonide valguse neeldumise, ülekande, peegelduse või radioaktiivsuse mõõtmiseks. Eraldatud tsoonid saab plaadilt eemaldada koos sorbendikihiga, komponendi saab desorbeerida lahustisse ja lahust analüüsida spektrofotomeetriliselt. TLC abil saab aineid määrata kogustes 10 -9 kuni 10 -6; määramisviga ei ole väiksem kui 5-10%.